药理效应法测定黄芩苷及清热合剂的药动学参数

    【关键词】清热合剂

　　摘要:目的药理效应法测定黄芩苷及清热合剂的药动学参数。方法采用小鼠热板致痛模型，以镇痛效应为指标，测定黄芩苷及清热合剂的药物动力学参数。结果黄芩苷及清热合剂口服给药后体存药量的表观动力学过程符合一室开放模型，主要药物动力学参数黄芩苷为：Ke=0.131h-1，Ka=0.428h-1,t1/2=5.299h,Tmax=4.000h,Cmax=509.900mg?kg-1,AUC=65.196mg?h?kg-1,CL/F=5802(mg?kg-1)/［h?(mg?kg-1)-1］；清热合剂为：Ke=0.103h-1，Ka=0.505h-1，t1/2=6.725h，Tmax=6.000h，Cmax=7.000mg?kg-1，AUC=39075.500mg?h?kg-1，CL/F=0.158(mg?kg-1)/［h?(mg?kg-1)-1］。结论清热合剂及黄芩苷体存量的表观动力学过程均符合一室开放模型，中药复方清热合剂的达峰时间明显慢于单方黄芩苷。

　　关键词:黄芩苷；清热合剂；药物动力学；药理效应法

　　Abstract:ObjectiveTodeterminepharmacokineticsparametersofbaicalinandQRHJwithpharmacodynamicseffect.MethodsPainmodelinducedwithhotplateinmicewasused,andlappinghindfoottimewastakenasindextoestimatemainpharmacokineticsparametersofBaicalinandQRHJ.ResultsAfterbaicalinandQRHJpo.inmice,apparentdynamicsfitonecompartmentopenmodel,themainpharmacokineticsparametersofbaicalinwere:Ke=0.131h-１,Ka=0.428h-１,t1/2=5.299h,Tmax=4.000h,Cmax=509900mg?kg-１,AUC=65.196mg?h?kg-１,CL/F=5.802(mg?kg-１)/［h?(mg?kg-１)-１］;andQRHJwere:Ke=0103h-１，Ka=0.505h-１，t1/2=6.725h，Tmax=6.000h，Cmax=7.000mg?kg-1，AUC=39075.500mg?h?kg１，CL/F=0.158(mg?kg-１)/［h?(mg?kg-1)-１］.ConclusionApparentdynamicsofbaicalinandQRHJbothfitonecompartmentopenmodel,TmaxofQRHJwasmuchlongerthanTmaxofbaicalin.

　　Keywords:baicalin;QRHJ;pharmacokinetics;pharmacodynamicseffectmethod

　　目前，药理效应法已经越来越广泛地用于中草药及其复方，特别是用于有效成分不明的中草药及其复方的药代动力学研究中［1］。清热合剂由黄芩、大青叶、葛根、贯众、茵陈五味中药组成，临床应用于解热、镇痛。因其所含有效成分复杂，目前尚无可靠的定量方法。依照传统中医药理论清热合剂中所含的若干单一的有效成分（如黄芩苷、葛根素）并不能代表的清热合剂的整体作用规律。为了更好地指导临床用药，我们从中医整体观念出发，建立小鼠热板实验模型，以小鼠舔后足的时间作为镇痛效应指标，用药理效应法分别测定清热合剂及黄芩苷的药动学参数，比较其作用差异，反应药物作用部位的药效变化规律。

　　1材料

　　1.1药品与试剂

　　清热合剂：1.35g?mL-1，中国医科大学附属第二医院药剂科生产，批号：20041207；黄芩，沈阳市中药材采购供应站提供。

　　1.2仪器

　　HH―S电热恒温水浴锅（江苏红旗医疗器械厂）；As10200B型超声清洗器（天津奥特赛恩斯仪器有限公司）。

　　1.3动物

　　昆明种小鼠，♀性，体质量18~22g，由沈阳药科大学动物中心提供，合格证号：辽实动质字SCXK［辽］2003―008号。

　　1.4统计学处理

　　数据以（±s）表示，使用DASver1.0作药代动力学数据拟合分析。

　　2方法与结果

　　2.1黄芩苷的提取

　　黄芩干燥根，粉碎，过80目筛。准确称取黄芩细粉（80目）100g，加乙醇水（体积比60∶40）1000mL，用20kHz超声处理2次，每次30min，双层纱布过滤，留取上清液，旋转蒸发仪回收尽乙醇及部分水，定容至100mL，黄芩苷含量为5.08％［2］。

　　2.2量效关系的确定

　　取18～22g的雌性小白鼠，依照文献方法［3］，将小鼠放在（55±0.5）℃的金属板上，以其出现舔后足的时间作为其痛阈值。选择痛阈值大于5s，而小于30s的小鼠90只作为疼痛反应合格鼠，取其2次的平均值作为给药前的正常值。然后随机将小鼠分为9组，每组10只，前4组分别按照300、600、900、1200mg?kg-1的剂量口服灌胃黄芩苷，于给药后的0.33、0.67、1、2、3、4、5、6、7、9、12、24h测定各个小鼠的痛阈值；后5组分别按照1.7、3.4、6.8、13.5、27.0g?kg-1的剂量口服灌胃清热合剂，于给药后的0.33、0.67、1、2、3、35、4、5、5.5、6、7、9、12、24h测定各个小鼠的痛阈值。首先选取各剂量组的痛阈峰值，计算出痛阈净升率，痛阈净升率=（用药后痛阈值－初始痛阈值）/初始痛阈值×100%。然后用各组对数剂量值及痛阈净升率回归得对数剂量－镇痛效应标准曲线方程，确定量效关系。

　　药理效应法测定黄芩苷及清热合剂的药动学参数黄芩苷的量效曲线方程为：y=34.30x＋5.14，R2＝0.938；清热合剂的量效曲线方程为：y=51.98x＋22.15，R2=0.978。方程中x为对数剂量，y为痛阈净升率。

　　2.3时效关系得确定

　　分别选取相当于黄芩苷（600mg?kg-1）及清热合剂（6.8g?kg-1）临床剂量作时效关系组，由量效曲线方程折算出相应的体存量，结果见表1、2。然后以实验中的时间对体存量即可得到时间－体存量关系，并可绘出药量时程，见图1、2。表1不同时间黄芩苷600mg?kg-1的镇痛效应（略）表2不同时间清热合剂6.8g?kg-1的镇痛效应（略）

　　2.4参数计算

　　将痛阈值测定时间与体存量数据经DASver1.0软件处理，得到黄芩苷及清热合剂的药代动力学参数，见表3。表3黄芩苷与清热合剂药代动力学参数（略）

　　3讨论

　　目前关于传统中药的研究主要集中在药理作用和有效成分的确定方面，本文以我院临床应用的清热合剂及黄芩苷为研究对象，并初步得到其药动学数据。研究结果表明黄芩苷、清热合剂的体内变化符合一室开放模型。黄芩苷、清热合剂在小鼠的体内代谢均出现了双峰现象，而且清热合剂的达峰时间慢于黄芩苷。可能与清热合剂的成分复杂，导致体内吸收速度变慢有关。而产生双峰的原因可能是药物在体内存在肠肝循环或其他循环过程（胃-肠循环、肠-肠循环）或者是存在多部分吸收所致。近年来，中药药代动力学的研究报道日益增多，但中药药代动力学的研究内容、思路和方法等，仍需要探索。

　　参考文献:

　　［1］韩国柱.中草药药代动力学［M］.北京：中国医药科技出版社，1998:212-214.

　　［2］王佩琪，王成明，卢静华.正交试验法优选超声提取黄芩苷的研究［J］.中医药学刊，2004，22（11）：2133.

　　［3］张慧灵，顾振纶，陈伯文.脑必通胶囊剂的镇痛作用［J］.中成药，2004，26（12）：1059.