七彩鲑受精卵不同发育阶段对外界刺激的敏感性试验

张耀红1，高倩1，葛京1，妥志利2，徐建华2，尹殿江2

（1.保定市水产技术推广站，河北 保定 071051；2.涞源县畜牧业发展服务中心，河北 涞源 074300）

成熟的七彩鲑卵为沉性大个体寡质卵，受精卵要经过220 ℃·d以上才能发眼，经过390 ℃·d以上才能破膜。期间为了防止水霉滋生，必须进行消毒、拣出死卵工作。关于虹鳟鱼、江鳕等冷水鱼胚胎发育敏感期已经确定，但各不相同，七彩鲑这方面的研究未见报道，因此我们结合涞源昌源渔场的孵化，开展了该鱼胚胎发育敏感期的试验。考虑到孵化在室内弱光进行，水温变化不大，水源为冷泉不存在污染，则外界刺激主要来源于人为的操作，包括挪移、翻搅、晃动等，为此我们设计了较大幅度的搅动、震动刺激，旨在为七彩鲑消毒、检卵、运输找到安全的节点，减少不必要的损失。

1材料与方法

1.1材料

孵化用水为地下冷泉水，孵化期间水温9～14.5 ℃，DO 6.0～8.5 mg/L。试验鱼卵为涞源昌源渔场培育的4龄盛产亲鱼自然成熟后2013年11月3日所获的受精卵，共3万余粒，用作胚胎发育观察及本试验。

1.2方法

将受精卵放入平列槽中流水孵化，每隔2 h观查胚胎发育，待受精卵30%以上发育到某一时期时，立即随机采卵50粒左右，剔除死卵、坏卵，放入500 mL烧杯中，加孵化用水200 mL，先用玻璃棒沿杯壁在距杯底3～5 cm处顺时针、逆时针各水平搅拌20次，搅拌速度2次/s，幅度以鱼卵随水流全部离底做漩涡状运动为宜，随后手握烧杯晃动10 s，晃动夹角不低于30°，频率为3次/s，最后用洗耳球（注意不要吸卵和撞击卵）在烧杯中部吸水，再用力放入，重复20次，使卵作上下翻转。将刺激后的卵倒入事先准备好的塑料盆内静置孵化，塑料盆直径40 cm，内装孵化用水20 cm，每天用虹吸管吸出盆内水量3/4，加注等量新水（换水时切莫触卵，加水时吸管口贴紧盆壁缓缓流入），保证DO在6 mg/L以上。定期观察处理后的卵，72 h后计算弃卵率，依据弃卵率[1]得出不同发育时期对外界刺激的敏感性关系。

2结果

七彩鲑鱼对外界刺激比较敏感，且在不同的发育阶段呈现出较为明显的差异，弃卵率起伏较大，试验结果如表1、表2。

3讨论

试验表明：七彩鲑的胚胎发育与虹鳟、大银鱼[2]（张耀红，1997）等冷水鱼一样，各期对外界的敏感性不同。七彩鲑卵在胚盘形成阶段，吸入的水充斥在卵膜和卵黄膜之间，此时搅动、震动会导致卵黄蛋白溢出使卵死亡，从弃卵率达21.5%也表明了这一现象，因此吸水0.5～1 h的卵对外界刺激较敏感；进入卵裂期、囊胚期的卵比较稳定，生产上可以进行第一次挑卵；随后敏感性又增强，到胚孔封闭后期--体节分化期达到最高，弃卵过半，此阶段必须保证发育卵处于绝对安静状态；而到达发眼期时，对外界刺激的敏感性降至最低，是发育阶段上的安全期，此时可以放心地进行检卵、消毒及长途运输。

试验期间，0.125 6 m2的塑料盆内放了50余粒卵，密度较小，加上每日定期换水，及时清除死、坏卵，没有出现水霉感染，避免了药物处理产生的误差。到了发眼期后，仍有2.9%的弃卵出现，这也说明敏感期之外的较强振动，胚胎也会有一定的感应性，因而无论何时运输都要避免强烈振动，必要时可采用一定的防护措施。

本试验虽确定胚孔封闭期-体节出现期为第一敏感期、原肠中后期为第二敏感期，但外界刺激致死的机理尚不清楚。虽然每次操作都固定同一人执行，但在搅拌、振动的力度、频次把握上尚有误差，对弃卵的判定标准也不可能完全一致，这些都对最终结果产生一定的影响。

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参考文献：

[1] 王庆龙.金鳟和虹鳟繁殖与育种关键技术研究[D].青岛：中国海洋大学硕士学位论文，2013

[2] 张耀红.振动对大银鱼胚胎发育的影响—大银鱼孵化中敏感期试验观察[J].渔业现代化，1997（3）：9-11

（收稿日期：2014-11-13）