硝酸芬替康唑凝胶阴道刺激性研究

王海 梅邵卿 梅胜尧 乔红群 刘晶

江苏省药物研究所，江苏南京 210009

[摘要] 目的 探讨硝酸芬替康唑凝胶按规定剂量给予兔阴道后对阴道的刺激性，为临床研究用药提供参考。方法 选取新西兰兔8只，雌性，按体重随机分为两组，给药1次/d，连续7 d，末次给药后24 h处死动物，取阴道进行病理组织学检查。结果 空白凝胶组4只动物阴道粘膜上皮细胞无明显变性、坏死，固有膜血管未见明显扩张充血，血管周围未见明显炎细胞浸润；硝酸芬替康唑组4只动物阴道黏膜固有层均见成纤维细胞增生，部分黏膜上皮脱落，并且1号阴道黏膜固有层见较多的坏死的中性粒细胞。 结论 连续给予硝酸芬替康唑阴道凝胶对阴道局部有一定的刺激性，有可能会引起部分阴道黏膜上皮脱落及局部水肿等炎症改变。

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关键词 硝酸芬替康唑；阴道刺激性；安全性

[中图分类号] R9 [文献标识码] A [文章编号] 1674-074２（２０１4）05（c）－０061-02

[作者简介] 王海梅（1981.7-），女，南京人，硕士，助理研究员，研究方向：药理毒理。

[通讯作者] 刘晶，副研究员，研究方向：药理毒理，邮箱：jansens@foxmail.com。

咪唑类抗真菌药物近年发展十分迅速，其中的硝酸芬替康唑抗菌谱广，对皮肤真菌、酵母菌和引起皮肤真菌病的其它真菌均有效，已被收载于《英国药典》（BP1998）。该药临床适用于阴道真菌感染的治疗[1]。该研究2009年12月—2010年3期间根据《化学药物刺激性、过敏性和溶血性研究技术指导原则》及《药物毒理学试验方法与技术》[2-3]，在GLP条件下，对硝酸芬替康唑凝胶的阴道刺激性进行实验研究，为临床安全用药提供实验依据，现报道如下。

1 材料与方法

1.1 药物

受试物均由江苏省药物研究所提供，硝酸芬替康唑凝胶（5 g：0.1 g），批号090301；空白阴道凝胶，批号K090301。

1.2 动物及饲养条件

1.2.1 动物 实验兔：8只，雌性，体重2.2~2.6 kg，3~4月龄，南京市江宁区青龙山动物繁殖场提供，生产许可证号：SCXK（苏）2007-0008。该机构实验动物的使用遵循3R（Reduction， RepLacement， Refinement）原则。实验方案在实施前必须得到本机构动物管理与使用委员会伦理审查批准。

1.2.2 饲养条件 实验动物饲养于本中心十万级屏障系统，兔1只/笼，动物室温度：18~28 ℃；湿度：40%~70%；照明：150~300 Lux（明暗交替6：00~18：00）；噪音：60 dB以下；换气次数：10~18次/h。自由摄取全价兔颗粒饲料和实验动物饮用水。

1.3 方法

1.3.1 阴道刺激性试验 本品临床拟用量为1次/d，5 g/次，连续用药7 d。该次试验动物一次性给予药物1.0 g，约为临床人用等效剂量的2倍（成人体重以70 kg计）。空白凝胶组同样一次给予1.0 g。给药方法为将兔仰卧位固定，导尿管消毒并以空白凝胶润滑后插入阴道深处，推动注射器，使药物进入阴道4~5 cm[4]。

取新西兰兔8只，雌性。按体重随机分为两组，分别为空白凝胶组和硝酸芬替康唑组，每组4只。给药1次/d，连续7 d。末次给药后24 h麻醉后放血处死动物，取出局部组织，观察有无充血、水肿、紫斑、分泌物和坏死等。同时取阴道做组织病理检查，进行常规取材、石蜡包埋、HE染色和光镜检查。观察有无组织变性、坏死等刺激性反应。同时取阴道做组织病理检查，进行常规取材、石蜡包埋、HE染色和光镜检查。观察有无组织变性、坏死、炎细胞浸润等刺激性反应。

2 结果

动物在给药期内，各组动物给药部位均未见糜烂、溃疡等病变。动物取材时肉眼检查发现硝酸芬替康唑组1号阴道内见淡黄色粘稠脓液附着表面。其它未见明显异常。见图1。

镜检结果如下：

空白阴道凝胶组：动物阴道黏膜上皮细胞无明显变性、坏死，固有膜血管未见明显扩张充血，血管周围未见明显炎细胞浸润，见图2。

硝酸芬替康唑组：1号阴道黏膜固有层见较多的坏死的中性粒细胞，成纤维细胞增生，黏膜上皮消失见图3。其余动物阴道黏膜固有层均见成纤维细胞增生，部分黏膜上皮脱落见图4-图6。

硝酸芬替康唑组4例阴道均见程度不同的病理改变，认为硝酸芬替康唑阴道凝胶会引起阴道上皮脱落、成纤维细胞增生等病理改变。

3 讨论

国外几十年来诸多使用家兔，猴，猪，犬，大鼠，豚鼠，小鼠等的比较研究结果表明家兔的阴道刺激性反应的敏感性高于人，符合安全性评价的实验目的，而且，操作相对简便，同时比较经济，因此，美国食品药品管理局（ FDA） 确定家兔为阴道刺激性试验的实验动物[5-6]。凝胶剂是现在发展很快的阴道给药剂型， 具有延长滞留时间，易涂布，能渗入黏膜皱褶，无异物感，无刺激性，能提高患者的顺应性等优点[7]。该药与克霉唑、咪康唑等药物相比，特点为用药次数少，用药1次/d，疗程3 d，而其他两种药物均需要用药7 d[8-9]。硝酸芬替康唑由于其疗程更短，可增加患者依从性，成为治疗妇女念珠菌性阴道炎的优先选择药物。本试验通过单独设置空白阴道凝胶组，考察了阴道凝胶处方本身对于阴道的刺激性，结果表明空白凝胶对于新西兰兔阴道无刺激性。连续给予硝酸芬替康唑凝胶对阴道有一定的刺激性，会引起阴道上皮脱落、成纤维细胞增生等病理改变，但这极可能是药物本身的作用引起的。根据本实验结果，硝酸芬替康唑对兔阴道具有一定的刺激性，而目前对该药的临床前安全性评价报道较少，因此对该药的处方工艺及安全性评价需要进一步研究。

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参考文献

[1] 胡汉昆，颜锵.硝酸芬替康唑阴道泡腾片的制备与质量控制[J].中国药房，2010，21（33）：3118-3120.

[2] 国家食品药品监督管理局. 化学药物刺激性、过敏性和溶血性研究技术指导原则[Z]. 2005-03.

[3] 袁伯俊， 廖明阳， 李波. 药物毒理学实验方法与技术[M].北京：化学工业出版社，2007：257.

[4] 李军涛， 李文学， 杨光宇，等.人体润滑剂对新西兰兔阴道粘膜刺激的试验研究[J].医学动物防制，2013 ，29（6）：642-644.

[5] 金毅，王平，王晓炜，等.新药申报与审评技术[J].阴道刺激性试验的规范化研究， 2012， 21（15）：1718-1721.

[6] Center for drug evaluation and research. Guidance for industry. Guidance for developments of vaginal contraceptive drugs， 6pp[EB/OL]. （2011－06－22）. http：//www.fda.gov/downloads/scienceResearch/SpecialTopics/WomensHealthResearch/UCM131211.pdf

[7] 刘玠， 翟春梅， 褚利娟，等. 中药凝胶剂在宫颈炎中的应用进展[J]. 中医药学报，2011，39（5）：88-90.

[8] 刘延玲. 硝酸咪康唑栓联合妇炎洁治疗霉菌性阴道炎56例[J]. 中国现代药物应用，2013，7（10）：74-75.

[9] 江布英. 克霉唑栓与氟康唑联合治疗念珠菌性阴道炎的疗效观察[J]. 现代诊断与治疗，2012，23（9）：1555-1556.

（收稿日期：2014-02-20）