脑脊液培养阳性的32例婴幼儿化脓性脑膜炎病原菌及药敏结果分析
2022-06-08
摘要：目的 分析脑脊液培养阳性的婴幼儿化脓性脑膜炎病原菌分布及药敏情况，为临床诊治提供参考。方法 对百色市妇幼保健院和百色市凌云县人民医院2010年1月～2014年8月31日检出的脑脊液病原菌培养阳性的患儿进行病原菌及药敏结果进行回顾性分析。结果 脑脊液细菌培养阳性共32例，分离病原菌32株，其中革兰阳性菌27株，占84.38%，均以凝固酶阴性葡萄球菌为主，占71.87%，前4位病原菌分别是表皮葡萄球菌、人葡萄球菌、耳葡萄球菌和溶血葡萄球菌；革兰阴性菌占15.63%。前四位病原菌对青霉素、氨苄西林、红霉素高度耐药，对前四位病原菌敏感药物是万古霉素、亚胺培南、环丙沙星、丁胺卡那及第三代头孢菌素，亚胺培南及万古霉素高度敏感，未发现耐药。结论 本研究发现表皮葡萄球菌、人葡萄球菌、耳葡萄球菌和溶血葡萄球菌为婴幼儿化脓性脑膜常见病原菌；万古霉素、亚胺培南及第三代头孢菌素可作为儿童化脓性脑膜炎首选抗菌药物。
关键词：化脓性脑膜炎；病原菌；药敏；婴幼儿
Pathogens and Drug Susceptibility Results Analysis of Suppurative Meningitis in 32 Cases of Infant with CSF Cultures Positive
LIU De-ying1，WANG Gong-liao2
（1.Lingyun County People's Hospital，Baise 533000，Guangxi，China；2.Baise Maternal and Child Health-Care Hospital，Baise 533000，Guangxi，China）
Abstract：Objective To investigate the distribution and drug resistance of pathogenic bacteria in infant purulent meningitis with positive cerebral spinal fluid culture results，and provide evidence for clinical therapy.Methods Bacteria sensitive date of the children with purulent meningitis in Baise Maternal and Child Health-Care Hospital and Lingyun County People's Hospital of Baise from January 2010 and August 31，2014 were retrospectively analyzed. Results From the 32 cerebrospinal fluid specimens，32 bacterial strains were isolated that including 27（84.38%） gram-positive strains.The strains are mainly coagulase negative staphylococcus （71.87%），and the leading four pathogenic bacteria were epidermis staphylococcus aureus、 staphylococcus aureus、ear staphylococcus and hemolysis staphylococcus，which are highly resistant to penicillin、ampicillin、 erythromycin and sensitive to pathogenic bacteria drug vancomycin、 imine south、ciprofloxacin、amikacin.Conclusion The common pathogenic bacteria of purulent meningitis in infant is epidermis staphylococcus aureus，staphylococcus aureus，ear staphylococcus and hemolytic staphylococci.Vancomycin，imine culture south of the 3 （superscript rd） generation cephalosporin fester sex meningitis can be used as first choice of children suppurative meningitis.
Key words：Suppurative meningitis； Pathogenic bacteria；Drug sensitive test；Infant
化脓性脑膜炎（bacterial meningitis，BM）是小儿，特别是婴幼儿时期的常见病，病情进展迅速，并发症和后遗症的发生率高，病死率也高[1、2]。近几年来随着儿童计划免疫的完善和抗生素的广泛、积极应用，婴幼儿BM发病率较前大幅度下降。但广西百色市地处边远山区，婴幼儿BM仍时有发现，婴幼儿BM的临床特点和病原菌的多重耐药率各地出现新的特点[3、4、5]。为此本研究对百色市妇幼保健院和百色市凌云县人民医院2010年1月～2014年8月31日检出的脑脊液病原菌培养阳性的患儿进行病原菌及药敏结果进行回顾性分析，为临床诊治提供参考。
1 资料与方法
1.1一般资料 2010年1月1日～2014年8月31日百色市妇幼保健院儿科和百色市凌云县人民医院内儿科符合化脓性脑膜炎诊断标准[1]，且脑脊液细菌培养阳性共32例。其中男19例，女13例，男女比例1.46：1；发病年龄7个月～6岁10个月。入院时均有以下一种或几种临床表现：反应低下、高热或体温不升、抽搐、呕吐、拒食、嗜睡、易激惹、烦躁哭闹、目光呆滞等。 1.2标本采集及细菌培养 对疑诊为BM的患儿在入院后严格无菌操作采集脑脊液，增菌培养后化种于血培养基和真菌培养基上，35℃培养16～20h。
1.3菌株鉴定 对有细菌生长者挑取菌落，经革兰染色初步分类后，以法国生物梅里埃公司的细菌自动鉴定系统--VITEK系统的GPI卡和GNI卡进行菌株鉴定。
1.4药敏试验 药敏试验和超广谱β内酰胺酶（extended spectrum β lactamases，ESBL）检测采用VITEK系统的药敏卡完成，小部分无鉴定卡和相应药敏卡的细菌采用纸片扩散法手工完成药敏试验。实验过程中采用相应菌株的标准株作为质量控制，并参照国际临床和实验室标准化研究所的指南进行操作和结果判读。
2 结果
2.1分离细菌的种类 脑脊液细菌培养阳性共32例，分离病原菌32株，其中革兰阳性菌27株，占84.38%，包括凝固酶阴性葡萄球菌、金黄色葡萄球菌、肺炎链球菌、微球菌、无乳链球菌，革兰阴性菌5例，占15.63%，分别是大肠埃希菌、肺炎克雷伯杆菌、铜绿假单胞菌、沙门菌D群及脑膜炎奈瑟菌各1株，见表1。
2.2常见病原菌药物敏感试验分析 选用临床常用20种抗菌药物对病原菌进行药物敏感试验，对脑脊液培养中最常见前4位病原菌进行抗菌药物敏感性分析，见表2。
3 讨论
化脓性脑膜炎是儿童时期常见的、由细菌引起的中枢神经系统急性感染性疾病，与其他非细菌感染的脑膜炎在临床表现上有很多相似之处，并且病情严重，进展快，常有不同程度的神经系统后遗症及病死率，早诊断和早治疗是改善预后的关键。
在我国，脑膜炎球菌、肺炎链球菌和流感嗜血杆菌是公认的常见病原菌[1]。但是，随着社会卫生条件的改善和抗生素的广泛应用，化脓性脑膜炎的病原菌分布产生较大变迁。陶陈娟[6]报道27例儿童化脓性脑膜炎脑脊液培养阳性的病原菌以肺炎链球菌和表皮葡萄球菌为代表的凝固酶阴性葡萄球菌为主，革兰阴性菌仅占12.2%。李先斌等[7]报道新生儿化脓性脑膜炎的常见病原菌，发现革兰阳性球菌占66%，排名前3位的菌种是表皮葡萄球菌、大肠埃希菌和溶血葡萄球菌。在2012年罗巧二报道[3]36例脑脊液培养阳性的儿童化脓性脑膜炎病原菌中格兰阳性球菌占75%，前3位的菌种分别是表皮葡萄球菌、大肠埃希菌和肺炎链球菌，最近2014年任伟等[5]报道43例儿童化脓性脑膜炎病原菌中革兰阳性球菌占比例更高，达90.7%，前3位病原菌是表皮葡萄球菌、无乳链球菌、人葡萄球菌。从这几位学者的报道看BM的病原菌均以革兰阳性菌为主，以凝固酶阴性葡萄球菌占优势，其中以表皮葡萄球菌为代表，但是从他们的报道中看也提示了BM病原菌发生了一定变迁。本组的病原菌中革兰阳性菌占84.38%，均以凝固酶阴性葡萄球菌为主，占71.87%，前4位病原菌分别是表皮葡萄球菌、人葡萄球菌、耳葡萄球菌和溶血葡萄球菌，革兰阴性菌占15.63%，与学者们报道的基本一致，但在本组资料中无乳链球菌和肺炎链球菌不再是优势菌，不排除本组资料标本量少的原因，有待于大样本进一步研究。凝固酶阴性葡萄球菌是皮肤常居菌，也是儿科血培养最常见的细菌，辨别其为污染菌还是致病菌一直为争论的焦点。所以，无菌标本分离到该菌应结合临床和脑脊液生化特点，排除污染可能。
本组选择脑脊液培养阳性前4位病原菌进行抗菌药物敏感性分析，前4位的病原菌共21株，占65.63%，前四位病原菌对青霉素、氨苄西林、红霉素高度耐药，对前四位病原菌敏感药物是万古霉素、亚胺培南、环丙沙星、丁胺卡那及第三代头孢菌素，亚胺培南及万古霉素高度敏感，未发现耐药。本研究虽然没有对肺炎链球菌、大肠埃希菌等在本组少见的病原菌进行耐药分析，近期的资料[3]提示上述少见的病原菌对亚胺培南、哌拉西林-他唑巴坦、万古霉素、头孢曲松、头孢噻肟等三代头孢菌素类抗菌素均敏感，与本组前4位病原菌药敏结果分析相符，所以可作为儿童化脓性脑膜炎首选抗菌药物。
脑脊液病原菌培养检测是诊断细菌性脑膜炎的确诊依据和金标准。细菌耐药性近年逐渐的提高，增加了经验性抗菌治疗的困难。因此，加强儿童化脓性脑膜炎病原菌耐药性的监测，及时准确检出耐药菌株，对指导临床合理应用抗生素具有积极的意义。
关键词：化脓性脑膜炎；病原菌；药敏；婴幼儿
Pathogens and Drug Susceptibility Results Analysis of Suppurative Meningitis in 32 Cases of Infant with CSF Cultures Positive
LIU De-ying1，WANG Gong-liao2
（1.Lingyun County People's Hospital，Baise 533000，Guangxi，China；2.Baise Maternal and Child Health-Care Hospital，Baise 533000，Guangxi，China）
Abstract：Objective To investigate the distribution and drug resistance of pathogenic bacteria in infant purulent meningitis with positive cerebral spinal fluid culture results，and provide evidence for clinical therapy.Methods Bacteria sensitive date of the children with purulent meningitis in Baise Maternal and Child Health-Care Hospital and Lingyun County People's Hospital of Baise from January 2010 and August 31，2014 were retrospectively analyzed. Results From the 32 cerebrospinal fluid specimens，32 bacterial strains were isolated that including 27（84.38%） gram-positive strains.The strains are mainly coagulase negative staphylococcus （71.87%），and the leading four pathogenic bacteria were epidermis staphylococcus aureus、 staphylococcus aureus、ear staphylococcus and hemolysis staphylococcus，which are highly resistant to penicillin、ampicillin、 erythromycin and sensitive to pathogenic bacteria drug vancomycin、 imine south、ciprofloxacin、amikacin.Conclusion The common pathogenic bacteria of purulent meningitis in infant is epidermis staphylococcus aureus，staphylococcus aureus，ear staphylococcus and hemolytic staphylococci.Vancomycin，imine culture south of the 3 （superscript rd） generation cephalosporin fester sex meningitis can be used as first choice of children suppurative meningitis.
Key words：Suppurative meningitis； Pathogenic bacteria；Drug sensitive test；Infant
化脓性脑膜炎（bacterial meningitis，BM）是小儿，特别是婴幼儿时期的常见病，病情进展迅速，并发症和后遗症的发生率高，病死率也高[1、2]。近几年来随着儿童计划免疫的完善和抗生素的广泛、积极应用，婴幼儿BM发病率较前大幅度下降。但广西百色市地处边远山区，婴幼儿BM仍时有发现，婴幼儿BM的临床特点和病原菌的多重耐药率各地出现新的特点[3、4、5]。为此本研究对百色市妇幼保健院和百色市凌云县人民医院2010年1月～2014年8月31日检出的脑脊液病原菌培养阳性的患儿进行病原菌及药敏结果进行回顾性分析，为临床诊治提供参考。
1 资料与方法
1.1一般资料 2010年1月1日～2014年8月31日百色市妇幼保健院儿科和百色市凌云县人民医院内儿科符合化脓性脑膜炎诊断标准[1]，且脑脊液细菌培养阳性共32例。其中男19例，女13例，男女比例1.46：1；发病年龄7个月～6岁10个月。入院时均有以下一种或几种临床表现：反应低下、高热或体温不升、抽搐、呕吐、拒食、嗜睡、易激惹、烦躁哭闹、目光呆滞等。 1.2标本采集及细菌培养 对疑诊为BM的患儿在入院后严格无菌操作采集脑脊液，增菌培养后化种于血培养基和真菌培养基上，35℃培养16～20h。
1.3菌株鉴定 对有细菌生长者挑取菌落，经革兰染色初步分类后，以法国生物梅里埃公司的细菌自动鉴定系统--VITEK系统的GPI卡和GNI卡进行菌株鉴定。
1.4药敏试验 药敏试验和超广谱β内酰胺酶（extended spectrum β lactamases，ESBL）检测采用VITEK系统的药敏卡完成，小部分无鉴定卡和相应药敏卡的细菌采用纸片扩散法手工完成药敏试验。实验过程中采用相应菌株的标准株作为质量控制，并参照国际临床和实验室标准化研究所的指南进行操作和结果判读。
2 结果
2.1分离细菌的种类 脑脊液细菌培养阳性共32例，分离病原菌32株，其中革兰阳性菌27株，占84.38%，包括凝固酶阴性葡萄球菌、金黄色葡萄球菌、肺炎链球菌、微球菌、无乳链球菌，革兰阴性菌5例，占15.63%，分别是大肠埃希菌、肺炎克雷伯杆菌、铜绿假单胞菌、沙门菌D群及脑膜炎奈瑟菌各1株，见表1。
2.2常见病原菌药物敏感试验分析 选用临床常用20种抗菌药物对病原菌进行药物敏感试验，对脑脊液培养中最常见前4位病原菌进行抗菌药物敏感性分析，见表2。
3 讨论
化脓性脑膜炎是儿童时期常见的、由细菌引起的中枢神经系统急性感染性疾病，与其他非细菌感染的脑膜炎在临床表现上有很多相似之处，并且病情严重，进展快，常有不同程度的神经系统后遗症及病死率，早诊断和早治疗是改善预后的关键。
在我国，脑膜炎球菌、肺炎链球菌和流感嗜血杆菌是公认的常见病原菌[1]。但是，随着社会卫生条件的改善和抗生素的广泛应用，化脓性脑膜炎的病原菌分布产生较大变迁。陶陈娟[6]报道27例儿童化脓性脑膜炎脑脊液培养阳性的病原菌以肺炎链球菌和表皮葡萄球菌为代表的凝固酶阴性葡萄球菌为主，革兰阴性菌仅占12.2%。李先斌等[7]报道新生儿化脓性脑膜炎的常见病原菌，发现革兰阳性球菌占66%，排名前3位的菌种是表皮葡萄球菌、大肠埃希菌和溶血葡萄球菌。在2012年罗巧二报道[3]36例脑脊液培养阳性的儿童化脓性脑膜炎病原菌中格兰阳性球菌占75%，前3位的菌种分别是表皮葡萄球菌、大肠埃希菌和肺炎链球菌，最近2014年任伟等[5]报道43例儿童化脓性脑膜炎病原菌中革兰阳性球菌占比例更高，达90.7%，前3位病原菌是表皮葡萄球菌、无乳链球菌、人葡萄球菌。从这几位学者的报道看BM的病原菌均以革兰阳性菌为主，以凝固酶阴性葡萄球菌占优势，其中以表皮葡萄球菌为代表，但是从他们的报道中看也提示了BM病原菌发生了一定变迁。本组的病原菌中革兰阳性菌占84.38%，均以凝固酶阴性葡萄球菌为主，占71.87%，前4位病原菌分别是表皮葡萄球菌、人葡萄球菌、耳葡萄球菌和溶血葡萄球菌，革兰阴性菌占15.63%，与学者们报道的基本一致，但在本组资料中无乳链球菌和肺炎链球菌不再是优势菌，不排除本组资料标本量少的原因，有待于大样本进一步研究。凝固酶阴性葡萄球菌是皮肤常居菌，也是儿科血培养最常见的细菌，辨别其为污染菌还是致病菌一直为争论的焦点。所以，无菌标本分离到该菌应结合临床和脑脊液生化特点，排除污染可能。
本组选择脑脊液培养阳性前4位病原菌进行抗菌药物敏感性分析，前4位的病原菌共21株，占65.63%，前四位病原菌对青霉素、氨苄西林、红霉素高度耐药，对前四位病原菌敏感药物是万古霉素、亚胺培南、环丙沙星、丁胺卡那及第三代头孢菌素，亚胺培南及万古霉素高度敏感，未发现耐药。本研究虽然没有对肺炎链球菌、大肠埃希菌等在本组少见的病原菌进行耐药分析，近期的资料[3]提示上述少见的病原菌对亚胺培南、哌拉西林-他唑巴坦、万古霉素、头孢曲松、头孢噻肟等三代头孢菌素类抗菌素均敏感，与本组前4位病原菌药敏结果分析相符，所以可作为儿童化脓性脑膜炎首选抗菌药物。
脑脊液病原菌培养检测是诊断细菌性脑膜炎的确诊依据和金标准。细菌耐药性近年逐渐的提高，增加了经验性抗菌治疗的困难。因此，加强儿童化脓性脑膜炎病原菌耐药性的监测，及时准确检出耐药菌株，对指导临床合理应用抗生素具有积极的意义。