三种不同方法检测乙型肝炎表面抗原的临床应用及比较

宋 莉

达州市中西医结合医院检验科，四川达州 635000

[摘要] 目的 结合临床实践经验，探讨3种不同方法检测乙型肝炎表面抗原的准确性、稳定性，为以后检测乙型肝炎提供依据。方法 选择132例乙肝患者作为观察组，138例非乙肝患者作为对照组，分别对两组用荧光免疫分析法、酶联免疫吸附法、胶体金法对乙型肝炎表面抗原进行检测，检测完毕后记录检测结果，对比三种方法的监测结果，探讨其临床应用价值。结果 三种方法的准确度由高到低分别为，时间分辨荧光分析法>酶联免疫吸附法>胶体金法；三种方法的灵敏度与特异度为，辨荧光分析法>酶联免疫吸附法>胶体金法，差异有统计学意义(P<0.05)。 结论 时间分辨时间荧光分析法能准确的检测出乙型肝炎表面抗原，误差小，无放射性污染，是目前公认的最好的检测方法，值得临床进一步推广和研究。

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关键词 ] 乙型肝炎表面抗原；检测；荧光免疫分析法；酶联免疫吸附法；胶体金法

[中图分类号] R446.6　　　[文献标识码] A　　　[文章编号] 1672-5654（2014）05（a）-0024-02

乙型肝炎是由乙型肝炎病毒(HBV)引起的一种世界性疾病，是一种严重危害人类的传染性疾病[1]。在我国，乙型肝炎患者多，覆盖面广，且我国人口众多，已经成为世界上乙型肝炎携带者最多的国家。据分析显示，健康人群中，携带乙型肝炎病毒的大约占到10%~15%[2]。所以，如何检测乙型肝炎病毒就成为了至关重要的问题，目前，检测方法主要有三种，时间分辨荧光分析法、酶联免疫吸附法、胶体金法。本文通过探讨三种检测方法的不同效果，从而分析三种方法的优劣和准确性，为以后应用更加科学的检验方法提供依据。

1 对象与方法

1.1研究对象

选择我院自2012年1月—2012年11月期间住院收治的132例患者乙肝的血清作为标本进行分析，其中男74例，女58例，年龄31～78岁，平均年龄（48.46±5.96）岁。

1.2研究方法

采用对照研究的方法，选取同期我院138例非乙肝患者作为对照组，其中男72例，女66例，年龄34～74岁，平均年龄（49.46±4.16）岁。132例乙肝患者作为观察组，两组患者的血清均采用时间分辨荧光分析法、酶联免疫吸附法、胶体金法等三种方法进行检测，所有仪器及试剂的操作均按相应的说明书及实验室操作规程进行，检测完毕后记录检测结果，对比三种方法的监测结果，探讨其临床应用价值。

1.3实验仪器与结果判定

时间分辨荧光免疫分析法检测试剂为HBsAg定量检测试剂盒（上海新波生物技术有限公司生产），仪器为SYM-810（上海新波生物技术有限公司提供），则根据试剂盒内提供的不同浓度的标准品制作标准曲线同时测定样本浓度并记录结果。

酶联免疫吸附法检测试剂为ELISA法定性试剂盒（北京万泰生物药业股份有限公司生产），仪器为RT-6000酶标仪（深圳雷杜），则用酶标仪进行测定并记录试验结果；

胶体金法采用由艾康生物技术（杭州）有限公司提供的试剂，参照说明书中判定方法并于实验后10~20min内判读结果。其中，灵敏度＝实验组实际检出阳性数／理论检出阴性数；特异性＝对照组实际检出阴性数／全部受检的未患病者总数；假阴性率＝１－灵敏度；假阳性率＝１－特异性。

1.4统计学方法

采用spss 17.0为统计学分析软件对数据进行分析处理，计数资料采用χ2检验，以P<0.05为差异有统计学意义[3]。

2 结果

2.1检测结果

经过检测，三种检测方法的准确度由高到低分别为时间分辨荧光分析法>酶联免疫吸附法>胶体金法。三组组见比较结果差异有统计学意义（P<0.05），具体检出例数见表1。

表1 三种检测方法检测结果

注：通过卡方检验，P<0.05差异有统计学意义。

2.2灵敏度、特异性、假阳性及假阴性比较

三种方法的灵敏度与特异度为辨荧光分析法>酶联免疫吸附法>胶体金法，三组组见比较结果有统计学差异（P<0.05），详见表2。

表2 三种检测方法的灵敏度、特异性、假阳性、假阴性（%）

3讨论

我国是HBV感染的高发区，其传染性强、传播途径多、流行面广、发病率高[4]。其感染会导致血浆中出现特异性的乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）及其他系列特性的血清标志物[5]。因此，血清中检出HBsAg是乙型肝炎的早期诊断指标之一。但由于试剂、仪器、方法学等存在差异，在ＨＢＶ感染初期，血浆中HBsAg的浓度较低，不同方法在检测结果方面存在差异，会造成一定程度的误诊或漏诊，甚至引发一系列医疗纠纷[6]。

根据检测结果进行分析，三种方法均可达到检验效果，但准确度却不大相同。胶体金法的特点是操作简单、成本低廉，采用高度特异性抗体抗原反应及免疫层析分析技术，且检测试剂稳定，便于保存，且具有检测速度快的特点[7]，但实验结果显示此种方法准确率较低，判定的误差较大，故此种方法只可作为初步筛选的依据。酶联免疫吸附法是目前我国应用最普遍的检测方法，敏感性高、特异性强，是适合与较大批量的血清的检测方法[8]。国产酶联免疫吸附法的试剂中检测乙型肝炎表面抗原的最低检出量是0.5ng/L，但是如果达到0.15ng/L，就会具有传染性，而且当血样中HBsAg浓度过高时，易引起钩状效应，造成假阴性结果[9]。时间分辨荧光分析法是20世纪80年代应用于临床的检测技术，也是近年来新发展起来的一种检测方法，该方法采用了电光学发光技术和磁性微珠包被等技术，具有更高的检测性能，可精确地检测出浓度低的HBsAg，大大的减少了检测过程中可能出现的误差。但该方法作为临床上来讲，成本较高，且仪器价格较贵，对实验室的硬件和检测水平的要求大大提高了。

综上所述，胶体金法检测方便快捷，可满足急诊和床旁检验的基本要求，但准确度不高。酶联免疫吸附法准确度高于胶体金法，可适用于批量的流行病学调查时使用。时间分辨荧光分析法能准确的检测出乙型肝炎表面抗原，误差小，无放射性污染，是目前公认的最好的检测方法，值得临床进一步推广和研究。

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参考文献]

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（收稿日期：2014-01-27）