猪圆环病毒病疫苗的应用

李少丽 李艳丽/ 杭州荐量兽用生物制品有限公司 李新华/ 中国农业科学院家禽研究所

一、猪圆环病毒病的概况猪圆环病毒病是最近几年才被发现的一种以仔猪断奶后多系统衰竭综合征和皮炎肾病综合征为主要临床特征的一种新的猪病，由猪圆环病毒（Porcine circovirus，PCV）引起。1991 年加拿大首先报道了该病。1997 年，Clark 首次证实了PMWS 的主要致病原是PCV2 病毒。2000 年，郎洪武等通过对多个省份采集血清样本的检测，证实了PCV2在我国的存在。

PCV2 属于圆环病毒科，圆环病毒属，无囊膜，由单股、共价闭合的环状DNA 组成，病毒粒子直径约17 nm，呈二十面体对称，是目前发现的最小的一种脊椎动物病毒。该病毒可分为两种血清型，即PCV1和PCV2。其中PCV1 对猪无致病性，广泛存在于猪体内和猪源传代细胞系中，PCV2 可在猪群内引发多种传染病，如断奶仔猪多系统衰竭综合征（PMWS）、猪皮炎肾病综合征（PDNS）等。PCV2 不仅可造成仔猪生长缓慢，还会侵害猪的免疫系统，导致猪群免疫抑制，直接引起其他传染病免疫的失败，并引发其他病原的继发感染。PCV1 基因组全长1 759 bp，PCV2 为1 767 bp或1 768 bp，共包括ORF1 和ORF2在内的11 个ORF。目前已证实，PCV2 的ORF1 编码与病毒复制有关的蛋白（Rep 蛋白），ORF2 编码病毒衣壳蛋白（Cap 蛋白），Cap 蛋白为病毒的主要结构蛋白，是刺激机体产生免疫应答的主要抗原，成为该病在流行病学诊断和疫苗研究中的热点。

二、国内外PCV2 疫苗的开发和应用情况

2001 年前后， 一些规模化猪场尝试用PCV2 典型发病猪的病变组织制作PCV2 组织苗以预防该病，效果很好。但因考虑到组织灭活苗的生物安全性，实际应用的猪场并不多。在商品化疫苗出现之前，PCV2 曾对我国养猪业造成了很大损失。目前我国养猪场PCV2 的血清阳性率高达90%，针对该病的国内外商品化疫苗主要为全病毒灭活疫苗、嵌合病毒疫苗。

1. 全病毒灭活疫苗。我国自2009 年以来，已有多个PCV2 疫苗产品上市，农业部批准上市的疫苗均为不同毒株和剂型的全病毒灭活疫苗。如浙江大学周继勇教授与荐量生物、诺倍威等共同开发的ZJ/C株、水包油（O/W）型猪圆环病毒2 型灭活疫苗，该毒株在PK-15 细胞上生长良好，灭活前半成品病毒含量可高达107.5TCID50/ml。其余均为油包水（W/O）型疫苗，如福州大北农与成都天邦开发的DBNSX07株灭活疫苗，灭活前半成品病毒含量105.5TCID50/ml 以上；武汉中博、科前生物、永顺等开发的WH 株灭活疫苗，灭活前半成品病毒含量在107.0TCID50/ml 以上；江苏南农高科与洛阳普莱柯等开发的SH 株灭活疫苗，灭活前半成品病毒含量在106.0TCID50/ml 以上；哈维科与上海海利等开发的LG 株灭活疫苗，灭活前半成品病毒含量在105.5TCID50/ml 以上。进口的全病毒灭活疫苗主要是法国梅里亚动物保健公司研发的PCV2 矿物油佐剂疫苗，推荐用于母猪的免疫，仔猪获得的母源抗体可以在5 周内有效抵抗PCV2 的侵袭。其免疫方式为间隔3 ～ 4 周免疫2 次，但必须在分娩前2 周完成，并且在下次怀孕期再次免疫。

2.PCV1-PCV2 嵌合病毒疫苗。美国富道公司研制的PCV2 嵌合病毒灭活苗，是将PCV2 的ORF2 片段置换不致病的PCV1 的ORF2 片段， 获得PCV1-PCV2 嵌合病毒，使其具有与PCV2 类似的免疫原性。主要为4 周龄以上猪使用，一次肌肉免疫注射。

3.PCV2 亚单位疫苗。勃林格殷格翰动物保健公司的PCV2 疫苗（CircoFlex） 和英特威/ 先灵葆雅动物保健公司的PCV2 疫苗（Circumvent））均是用昆虫杆状病毒表达PCV2 的ORF2 基因，大量获得具有免疫原性的PCV2 核衣壳蛋白，再加入佐剂制成PCV2 亚单位疫苗。勃林格疫苗的免疫方式是对3 周龄仔猪给予一次免疫肌肉注射。大量田间试验表明，该疫苗可为仔猪提供良好的保护。先灵葆雅疫苗的免疫方式为3 周龄以上猪，间隔3 周给予2 次肌肉注射。

4.PCV2 疫苗应用情况。进口疫苗价格昂贵，如勃林格的PCV2 亚单位疫苗是获得我国农业部批文的唯一一家外资企业，其市场标价为28 元/ 头份（ 国内疫苗约10 元/头份），虽可对仔猪提供良好的免疫保护效果，但由于价格太高，导致一些养殖场“用不起”，国内养殖场一般对种公猪、种母猪、后备母猪等才使用进口疫苗，而对于生产用肉猪不免疫或只免疫国产疫苗。

针对PCV2 灭活苗存在着病毒灭活不彻底，疫苗副反应大，免疫持续期短而需二次免疫，以及进口疫苗价格昂贵等特点，目前国内有些疫苗生产厂家已经开始致力于基因工程疫苗的开发，如2014 年斯澳生物的猪圆环病毒基因工程疫苗已获农业部临床试验批文，青岛易邦的猪圆环病毒2 型基因工程亚单位疫苗“易圆净”也已经发布上市；这些都标志着猪圆环病毒基因工程苗已进入国产化阶段，并将逐步取代价格昂贵的进口疫苗，成为百姓“用得起”的疫苗产品。

三、展望

猪圆环病毒病是全球公认的危害养猪业的重要疫病，该病可造成T、B 淋巴细胞在外周血中含量降低，并可诱导CD4、CD8 等细胞凋亡，造成免疫抑制，不仅造成该类疫苗的免疫失败，而且容易继发或并发副猪嗜血杆菌、猪附红细胞体、猪蓝耳病、伪狂犬等病原，业内称之为猪的“艾滋病”。由于猪PCV2 疫苗的免疫普及率仅在20% ～ 30% 左右，按我国每年生猪出栏量6 亿头，50%免疫比例，10 元/ 头份计算，未来我国圆环疫苗的市场销售额将高达30 亿元左右。PCV2 疫苗已成为继猪瘟、口蹄疫、蓝耳病、伪狂犬等疫苗之后的首个使用量最大的疫苗品种，有很大的发展前景。因此研制开发高效、安全、廉价的PCV2疫苗成为防控该病的必然趋势。

参考文献（略）