口蹄疫灭活抗原在不同保存条件下146S降解情况的研究

苍枫 郝鹏 张立华 曹玉梅 张慧芳 李敏 董俊余 张永峰 熊德晶 刘国英 范秀丽/ 金宇保灵生物药品有限公司

口蹄疫灭活疫苗中完整病毒146 S 粒子的含量是影响疫苗免疫效果的关键因素，生产过程中采用合理的保存温度和浓度，有助于延长病毒的保存期和维持较高的抗原水平，对生产过程中科学地指导的抗原的保存有重要意义。本文针对不同保存温度和浓度对口蹄疫灭活抗原146 S 含量的降解率进行了测定。

（一）材料

1. 口蹄疫病毒抗原。O 型O/GX/09-7 株灭活抗原，由金宇保灵公司生产部提供。

2. 乳化佐剂。206 佐剂，购自赛比克公司。

3. 仪器设备。超速冷冻离心机，紫外分光光度计，生物安全柜，玻璃容器，移液器等。

（二）方法

1．样品抽取。随机抽取本公司生产部O 型/GX/09-7 株灭活抗原液及其相应批号的10 倍浓缩纯化液，分别取样进行初始样品146 S 含量的测定。

2. 样品分装。将原液样和10倍浓缩后样分别分装，20 ml/ 瓶。每组样品不少于20 个。

3. 样品保存。每种样品分2 组，分别在-20℃和4℃冰箱中保存7个月。

4. 定期检测。每月定期各取出1 个样品分别进行146 S 的测定。

5.146 S 测定。按照我公司内部使用的蔗糖密度梯度紫外光定量法，检测146S 抗原的含量。

（三）结果（见表1、2）

（四）讨论

口蹄疫O/GX/09-7 株灭活病毒在4℃和-20℃保存的7 个月中，完整病毒146 S 粒子的含量均有所下降。4℃保存条件下，原液样和浓后样完整病毒146 S 粒子的降解率分别为27.5%、12.3 % ；-20 ℃ 保存条件下，其降解率分别为87.5%、92.4%。本实验数据显示：4 ℃比-20℃保存条件更有利于抗原的保存；浓度对其影响不显著。建议在FMD 生产过程中，灭活抗原在6 个月的保存期内采用4℃条件存放。

当然，口蹄疫完整病毒146 S粒子的稳定性受很多因素的影响，如溶液的PH 值、渗透压、冻融次数等，最佳保存条件将综合考虑各种因素对其的影响，进一步科学的结论有待于更多实验的验证和数据的积累。

参考文献（略）