猪支原体肺炎活疫苗与灭活苗比较分析

王留/ 河南商丘职业技术学院动物工程系

猪支原体肺炎是由猪肺炎支原体引起的一种慢性呼吸道传染病, 又称猪气喘病和猪地方流行性肺炎, 广泛流行于世界各养猪国家和地区, 是一种顽固性慢性传染病。临床表现咳嗽和气喘，患病动物体温、食欲变化不明显，剖检可见肺脏心叶、中间叶和尖叶有融合性支气管炎，呈现肉样或肝样病变。国内猪支原体肺炎的发病率为30% ～ 50%，而感染率高达85% 以上。

猪支原体肺炎的预防、控制和净化须采取早期诊断、及时隔离、抗生素治疗或淘汰病猪、疫苗接种、全进全出、严格消毒等综合性措施，其中疫苗预防起着关键性作用。大量研究已经证实了支原体疫苗带来的经济效益，使用肺炎支原体疫苗可以降低肺炎发生率和与肺炎支原体感染有关的经济损失，在感染严重的猪场其效益和成本的比例可以达到5 ∶ 1。

目前国内应用的猪肺炎支原体疫苗包括弱毒活疫苗和灭活苗，活疫苗由于胸腔注射途径难于掌握，副反应较大，因此推广受到限制，而灭活疫苗特别是新型佐剂和双重佐剂的疫苗在田间显示出对猪支原体肺炎较为理想的控制效果。现仅从以下几个方面对猪肺炎支原体弱毒活疫苗和灭活苗的优缺点进行比较分析，以期为猪肺炎支原体疫苗的临床选用提供参考。

（一）弱毒活疫苗和灭活苗特征

1. 弱毒活疫苗。在国内, 弱毒活疫苗主要有猪肺炎支原体兔化弱毒苗和168 株无细胞培养弱毒苗,它们分别由北京兽药监察所和江苏农科院畜牧兽医研究所研制成功。猪肺炎支原体弱毒活疫苗采用胸腔和肺部注射的免疫途径不易为一般用户接受, 因而在推广应用上受到一定限制。

猪肺炎支原体兔化弱毒苗于1989 年由北京兽药监察所研制成功，该疫苗采用济南强毒株在乳兔山连续传代致弱后获得兔化弱毒株，经配苗冻干后制成兔化弱毒苗。经临床试用证明，该毒株制成的疫苗安全有效，能使80% 的免疫猪在强度攻击后肺部组织不出现任何病变，而对照组全部发病。

猪肺炎支原体168 株无细胞弱毒苗于2006 年由江苏省农科院兽医研究所和南京天邦生物科技有限公司研制成功，该疫苗采用猪支原体肺炎168 株，通过无细胞培养扩繁获得大量抗原，经配苗冻干后制成弱毒活疫苗。

猪支原体肺炎168 株分离于1979 年甘肃省兰州市安宁区猪肺炎支原体强毒株人工感染发病的168 号二花脸猪，经3 次克隆化培养，无细胞培养340 代次，人工致弱为弱毒菌株。经过漫长的致弱过程，猪肺炎支原体的毒力基因发生了改变，通过大量的实验室与临床试验，证明168 弱毒株具有其独特稳定的基因特征，安全性稳定，同时具有良好的免疫原性。

2. 灭活苗。国内目前应用的猪支原体肺炎灭活苗主要从国外进口，如美国辉瑞公司生产的“瑞倍适”、“瑞倍适- 旺”和“瑞富特”，美国梅里亚公司生产的“猪克喘”，美国先灵葆雅公司生产的“安百克”，德国勃林格公司生产的“茵格发”，西班牙海博莱公司生产的“喜可舒”等，这些疫苗都是利用新型佐剂研制成功的猪肺炎支原体灭活疫苗, 并进行了商品化生产, 其共同点是可以刺激机体产生较强的体液和细胞免疫应答。

瑞富特灭活苗由美国辉瑞公司生产，选用二乙烯亚胺（BEI）作为灭活剂，使P97 蛋白暴露出来（P97 蛋白被普遍认为是保护性抗原），可诱导机体产生更好的局部黏膜免疫和细胞免疫。它既保持了菌体的完整性，又大大提高了疫苗的免疫原性。瑞富特应用Carbopol 水质佐剂，它是一种交联的丙烯酸聚合物，具有5 项主要功能：①有效浓缩抗原；②使不溶的成分持久悬浮；③使水包油乳剂稳定; ④使抗原缓慢释放，促进抗原递呈给效应细胞，显著加强免疫反应和免疫效率；⑤促进机体产生更高水平的体液抗体和细胞免疫力，更快速启动免疫系统和增强保护力。同时，该佐剂免疫应激微弱，不激发猪圆环病毒复制。

猪克喘灭活苗由美国梅利亚公司生产，采用猪肺炎原体BQ14 株和菌膜蛋白双效抗原，以水性氢氧化铝胶为佐剂，提升了疫苗保护力，有效降低支原体危害。水性氢氧化铝佐剂能快速释放抗原，对3 日龄猪免疫注射依然安全，初生猪早期免疫阻断产房仔猪感染，有效地保护仔猪。

瑞倍适和瑞倍适- 旺灭活苗于1990 年由美国辉瑞公司研制并商品化生产，该疫苗含有化学灭活的肺炎支原体全部细胞培养物，采用纯化的天然油质Amphigen佐剂，疫苗安全无副作用，在实验条件下，疫苗不能预防感染，但能减轻临床症状和肺炎病变。经临床试验证明免疫猪用同源菌、异源菌攻毒后，肺脏受损程度分别下降82% 和91%，具有增加增重、缩短饲养期及降低多杀性巴氏杆菌和胸膜肺炎放线杆菌感染的效果。田间研究证实，用猪肺炎支原体灭活疫苗免疫，能有效降低肺病变程度及屠宰猪支气管肺炎的发生率。但是在当今我国猪场猪圆环病毒2 型阳性率非常高的现实情况下，应该谨慎使用油质佐剂的猪肺炎支原体疫苗，以免由于油质佐剂导致PMWS 的风险。

（二）弱毒活疫苗和灭活苗免疫机理

在猪肺炎支原体的抗感染免疫中，体液免疫、细胞免疫和黏膜免疫所扮演的角色及抗感染机制不同。有证据表明，在抗猪肺炎支原体感染中抗体仅起到部分保护作用，保护性免疫主要基于细胞免疫和猪呼吸道黏膜IgA 的分泌。邓均华等认为猪呼吸道的免疫属于黏膜免疫, 主要通过呼吸道黏膜上皮分泌的IgA(sIgA) 抑制病原体对细胞的黏附作用。此外, 猪肺炎支原体主要侵袭猪的呼吸道上皮纤毛顶端, 而体液循环抗体不容易到达该部位, 即使通过免疫接种后, 在血清中检测到高滴度的抗体, 也不一定能对猪呼吸道提供理想的的抵抗病原入侵的作用。

研究证明, 猪肺炎支原体168 株活疫苗能同时刺激产生体液免疫（循环抗体）、局部黏膜免疫（分泌型IgA）以及细胞免疫3 种免疫效应, 免疫效力坚强而持久,只需正确接种1 次, 便可在2 周内产生保护力,1 个月抗同群感染,2 个月抗强毒感染, 免疫期可达6 个月。

猪肺炎支原体的免疫应答主要以细胞免疫为主, 而灭活疫苗却主要激发动物机体的体液免疫, 因此以体液免疫为主的常规灭活疫苗免疫效力很低。目前已经商品化生产的猪肺炎支原体灭活苗大多采用新型佐剂，如Carbopol 水质佐剂和Amphigen 佐剂，可以刺激机体产生较强的体液免疫和细胞免疫应答。

（三）疫苗免疫接种方法

猪肺炎支原体168 株活疫苗采用“苏气”穴肺内注射，即疫苗按瓶签注射头份用灭菌生理盐水稀释后, 在右侧肩胛骨后缘沿中轴线向后2 ～ 3 肋间, 用9 号短针头垂直进针注射1 头份（0.5 ml）。仔猪在5 ～ 7 日龄免疫接种1 次即可，1 个月后产生免疫力，免疫期9 个月以上。免疫前后1 ～ 2 周禁用抗支原体的药物( 如土霉素、壮观霉素、卡那霉素、林肯霉素、泰乐菌素等) 等，但可用青霉素、链霉素、阿莫西林、头孢菌素控制蓝耳病及细菌感染。

猪克喘灭活苗采用耳后颈部深度肌肉注射，3 日龄至10 周龄猪进行第一次免疫，3 周后进行第二次免疫，每头猪每次注射2 ml。

瑞倍适灭活苗采用肌肉注射接种，哺乳仔猪在1 和3周龄各免疫1 次，怀孕母猪分娩前2 周免疫1 次，公猪每隔半年加强免疫1 次，每次2 ml ，肌肉注射。免疫期6 个月。

（四）疫苗免疫效力

赵卓等用猪支原体肺炎活疫苗对1 ～ 2 月龄健康仔猪进行免疫接种，免疫后60 d 进行攻毒保护试验并剖杀进行肺脏特异性病变观察，根据肺脏病变计分计算肺炎减少率达到80% 以上。刘茂军等用猪支原体肺炎活疫苗(168 株) 对7 000 多头猪进行了临床免疫试验，发现免疫猪群支原体肺炎发病率减少，肺部病变减轻，有效控制率达80% 以上，许多猪场达90%，生产指标有明显提高。苏国东等对猪支原体肺炎活疫苗(168 株) 进行了免疫效力试，结果表明猪支原体肺炎活疫苗(168 株) 免疫仔猪60 d 后，免疫保护率达80% 以上，免疫后7 个月保护率仍有50% 以上，说明猪支原体肺炎活疫苗(168 株) 具有很好的免疫效力。

Reynolds 等用灭活疫苗进行免疫保护试验发现，用过疫苗的试验猪抗体滴度均比非免疫猪高，肺脏评分均比非免疫组低。Tzivara 等对两个猪场进行猪支原体肺炎灭活疫苗的疗效试验，结果表明免疫猪没有猪支原体肺炎临床症状，肺脏病变指数比非免疫猪低，增重比非免疫猪平均高4 ～ 6 kg。这些结果说明猪支原体肺炎灭活疫苗从免疫效果看确实有效。

大量的免疫试验和临床已经证实了猪肺炎支原体疫苗可有效预防支原体感染，减轻肺脏损伤，诱导血清抗体和呼吸道局部免疫抗体，诱导细胞免疫。既可以减少降低肺炎的发病率、减轻感染压力，还可以提高免疫猪群的生长速度、降低饲料消耗，增加经济收益。

参考文献（略）