色谱样品的制备方法

　　环境污染物在食品成分中的存在，有自然背景和人类活动影响两方面的原因。其中，无机环境污染物在一定程度上受食品产地的地质地理条件所左右，更为普遍的污染源主要是工业、采矿、能源、交通、城市排污及农业生产等带来的，通过环境及食物链而危及人类饮食健康。这就需要一种或几种特殊的样品前处理方法把污染物质从农产品中提取出来。
　　1色谱分析法概述
　　色谱分析方法作为一种分离技术与方法，目前广泛地应用于环境保护监测、生物样品分析、农产品质量检测、食品分析、香料组成分析、农药与农药残留分析等领域。色谱分析方法主要包括气相色谱、液相色谱（包括离子色谱）、平面色谱及相关的联用技术。如：气相色谱-质谱、液相色谱-质谱、色谱-红外光谱等的联用分析技术。色谱分析方法具有分离效率高、成本低、易于与其他仪器装置联用等特点。
　　2色谱样品的制备方法
　　色谱样品制备技术是随着分离科学的发展而发展的，目前主要使用膜分离、固相萃取、吸附-热解吸等新方法来分离预测定组分和干扰组分。
　　2.1溶剂萃取方法
　　溶剂萃取法是利用有机溶剂将样品中的有机毒物如农药、真菌毒素等提取出来加以纯化、浓缩供检测用的一种分离方法，通常也叫液-液萃取。常用于样品中被测物质与基质分离，在两种不相溶液体互相之间通过分配对样品进行分离而达到被测物质纯化和消除干扰物质的目的。通常，分析化学家首先在有机溶剂中分离出感兴趣的被测物质，然后，由于常用的溶剂具有较高的蒸气压，可以通过蒸发的方法将溶剂除去，以便浓缩这些被测物质的目的。
　　2.2固相萃取方法
　　固相萃取方法广泛被应用于样品处理中，主要用来对即将进行分析的样品进行浓缩和纯化处理。固相萃取方法的分离机制与液相色谱方法相同，分离方式主要分为离子交换、吸附、正相和反相。
　　固相萃取所用的吸附剂也与液相色谱常用的固定相相同，只是在粒度上有所区别。使用固相萃取法能避免液-液萃取所带来的许多问题。比如，易于乳化，不完全的相分离，较低的定量分析回收率，昂贵易碎的玻璃器皿和大量的有机废液。与液-液萃取相比，固相萃取更有效，容易达到定量萃取，快速和自动化，一般说来固相萃取所需要时间为1/2，而费用为液-液萃取的1/5。固相萃取通常是用于液体样品的准备和不易或不挥发样品的萃取，但是也用于能预先提取到溶液里的固体样品。其缺点是：目标化合物的回收率和精密度要低于液-液萃取。
　　2.3微波萃取技术
　　在传统的萃取过程中，能量首先无规则地传递给萃取剂，然后萃取剂扩散进入基体物质，再从基体溶解或夹带多种成分扩散出来，即遵循加热-渗透基体-溶解或夹带渗透出来的模式。微波萃取是利用微波能来提高萃取效率的一种新技术。微波溶出法主要适合于固体或半固体样品，样品制备的整个过程需要经粉碎、与溶剂混合、微波辐射、分离萃取等步骤。
　　2.4微波萃取的特点
　　传统的萃取过程中能量积累和渗透过程以无规则的方式发生，萃取的选择性很差，有限的选择性只能通过改变溶剂的性质或延长溶剂萃取时间来获得，前者由于同时受溶解能力和扩散系数的限制，选择面很窄；后者则大大降低了萃取效率和速度。微波萃取由于能对萃取体系中的不同组分进行选择性加热，因而成为至今唯一能使目标组分直接从基体分离的萃取过程，具有较好的选择性，同时提高了萃取效率。
　　2.5衍生化技术
　　衍生化技术对提高检测的灵敏度与悬着性、改善色谱分离、提高理化稳定性、分离结构近似的组分和辅助定性有重要作用。衍生化反应过程中要注意在使用一些对水"敏感"的衍生化试剂时一定要对样品和使用的溶剂进行脱水，并在反应过程中避免水汽干扰。用反应容器特别是密封垫片的材料应绝对不含目标化合物，衍生化试剂和所用溶剂也要进行纯化，不能含目标化合物。当生成衍生物产物是易挥发化合物时应用密封的衍生化容器或低温冷冻处理防止目标化合物的流失。衍生化反应完成后应及时惊醒色谱缝隙，如不能及时分析，要将衍生化产物妥善存放，并尽快进行分析。