Galectin—3和E—cadherin蛋白在胃癌中的表达及其意义

　　胃癌是临床常见的恶性肿瘤，近年来死于胃癌的患者呈逐年上升的趋势。癌症的发生与多种因素相关，而胃癌的侵袭以及转移是导致患者死亡的主要原因之一。Galectin-3是一种凝集素，参与多种生理以及病理过程，其在细胞生长、凋亡、粘附以及新生血管形成、肿瘤细胞转移和浸润中均发挥重要的作用。E-cadherin蛋白是一类介导细胞间同质粘附的钙依赖性跨膜糖蛋白，其表达与恶性肿瘤的分化程度、侵袭力、转移呈负相关，与预后呈正相关[1]。本研究探讨胃癌组织中Galectin-3及E-cadherin蛋白的表达，分析其在胃癌的发生、发展中的作用。

　　1资料与方法

　　1.1一般资料

　　选择2010～2012年在我院手术治疗切除的胃癌组织标本60例，其中男28例，女32例，年龄31～66岁，平均（53.1±18.4）岁。肿瘤直径<4cm者25例，≥4cm者35例。肿瘤浸润深度：黏膜及黏膜下层（T1+T2）者8例，肌层及浆膜层（T3+T4）者52例。淋巴结转移：有32例，无28例。分化程度：高分化及中分化29例，低分化31例。同时取手术切除组织正常切缘的正常胃黏膜组织作为对照组。

　　1.2检测方法

　　采用免疫组化法对胃癌黏膜组织以及正常胃黏膜组织中Galectin-3及E-cadherin蛋白表达进行检测。Galectin-3兔抗人单克隆抗体由上海研生生物技术科技有限公司提供，E-cadherin兔抗人单克隆抗体由上海研生生物技术科技有限公司提供。标本甲醛固定、石蜡包埋、连续4μm切片。清洗玻片后烤干，浓硫酸中浸泡24h，冲洗后烘干，多聚拉氨酸进行放脱片处理，烤干，备用。切片，梯度酒精脱水、水洗。3%的过氧化氢溶液室温下孵育15min，以封闭内源性过氧化物酶的活性。水冲洗后，PBS缓冲液洗涤3次。将切片置于枸橼酸缓冲液中，微波炉内高火烘烤5min，中高火烘烤8min，冷却至室温。然后自来水冲洗，蒸馏水冲洗，PBS缓冲液洗涤3次。甩干，加入封闭血清，在37℃下孵育15min。倒去血清，滴加一抗或者一抗的工作液，37℃，孵育2h。PBS缓冲液洗涤3次。加二抗工作液，37℃，孵育20min，PBS缓冲液洗涤3次。加DAB显色液，有表达后立即终止显色。

　　1.3免疫组化结果判定

　　1.3.1Galectin-3结果判定位于上皮细胞的胞浆内，棕黄色颗粒。判断结果[2]：每张切片随机观察5个视野，统计阳性细胞数，取平均阳性率记分。0分：<5%；1分：5%～24%；2分25%～49%；3分：50%～74%；4分：≥75%。染色强度：0分：无着色；1分：淡黄色；2分：黄色或者棕黄色；3分：褐色或者棕褐色。阳性细胞率得分+染色强的得分3～6分者为染色阳性。

　　1.3.2E-cadherin蛋白结果判定在正常组织内位于上皮细胞的细胞膜上，在癌组织中位于细胞浆和细胞膜中。染色呈一致的棕黄色颗粒。染色阳性判断标准与Galectin-3结果判定相同。

　　1.4观察指标

　　比较胃癌组织与正常胃黏膜组织中Galectin-3及E-cadherin蛋白表达阳性率。统计患者的一般资料以及临床资料，分析不同临床病理参数与Galectin-3及E-cadherin蛋白表达阳性率的关系。

　　1.5统计学分析

　　采用SPSS12.0统计学软件对数据进行相关统计学分析。计数资料采用χ2检验，P<0.05为差异有统计学意义。

　　2结果

　　2.1胃癌组织与正常胃黏膜组织中Galectin-3及E-cadherin蛋白表达情况

　　Galectin-3位于上皮细胞的胞浆内，呈棕黄色颗粒，见图1。E-cadherin蛋白在癌组织中细胞膜和细胞浆均有表达，在正常胃黏膜中主要位于上皮细胞的细胞膜上，呈棕黄色颗粒，见图2。60例胃癌组织中Galectin-3阳性例数44例，占73.3%。60例正常胃黏膜中23例阳性，占38.3%。E-cadherin蛋白在胃癌组织中有23例患者呈阳性染色，占38.4%，在正常胃黏膜中60例为阳性，占100.0%。见表1。

　　2.2不同临床资料Galectin-3及E-cadherin蛋白阳性表达情况