活血止痛凝胶体外释放和经皮渗透性研究
2022-06-09
[摘要] 采用Franz扩散池进行实验，以半透膜和小鼠皮肤为透过屏障，采用HPLC测定接受液[PEG400-95%乙醇-水（1∶3∶6）]中丹皮酚的含量，考察活血止痛凝胶体外释放和经皮渗透规律。结果显示，活血止痛凝胶中丹皮酚的释药规律符合Weibull方程，拟合方程为ln[-1/（1-Q）]=-0.790 5lnt-1.701 2（r=0.980 9），在8 h内丹皮酚的累积释放率为85.18%，释放速率为2.827 μg·cm-2·h-1;丹皮酚的累积经皮渗透率以零级模型拟合好，拟合方程为Q（t）=1.757 9t+0.721 3（r=0.999 1），给药8 h后丹皮酚的累积经皮渗透率为54.85%，渗透速率为1.820 μg·cm-2·h-1。研究结果表明，活血止痛凝胶具有良好的释放透皮性能。
[关键词] 释放; 透皮; 丹皮酚; HPLC; 活血止痛凝胶
活血止痛凝胶由白芷、牡丹皮、天南星、冰片等组成，有活血止痛、疏通经络的作用。外用凝胶剂作为新型的外用制剂，由于具有良好的生物相容性，易于涂抹，局部给药后易于吸收、不污染衣物、稳定性好。此外，凝胶基质多为亲水性高分子材料，有利于皮肤水合形成，促进药物的吸收，所以成为近年来外用制剂研究热点。本实验以方中君药牡丹皮中丹皮酚为指标，采用不同模型对体外释药曲线与经皮给药数据进行拟合，考察活血止痛凝胶的体外释放与经皮渗透规律。
1 材料
高效液相色谱仪（2487型双波长紫外检测器，717型自动进样器，美国Waters），BSA224S CW型电子分析天平（德国赛多利斯公司），TK-20B型Franz扩散池（上海锴凯有限公司），透析袋（截留相对分子质量7 000，北京经科宏达生物技术有限公司）。
活血止痛凝胶（自制，批号13111），丹皮酚（中国食品药品检定研究院，批号110708-200506），聚乙二醇（PEG，国药集团化学试剂有限公司），甲醇为色谱纯，水为哇哈哈纯净水，其余试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2.1 方法学考察
2.1.1 对照品溶液的制备 精密称取丹皮酚对照品适量，置10 mL量瓶中，加甲醇配成0.646 g·L-1的溶液，即得。精密移取上述对照品溶液0.1 mL，置于100 mL量瓶中，加甲醇定容至刻度，配成0.646 mg·L-1的对照品溶液备用。
2.1.2 供试品溶液的制备 取体外释放（透皮）接收液，过0.22 μm微孔滤膜，弃去初滤液，取续滤液，进样量10 μL。
2.1.3 色谱条件与系统适应性考察 高效液相色谱仪（2487型双波长紫外检测器，717型自动进样器，美国Waters），Diamonsil C18色谱柱（4.6 mm×250 mm，5 μm），流动相甲醇-0.1%磷酸水溶液（50∶50）;流速1.0 mL·min-1，柱温35 ℃，检测波长274 nm，理论塔板数为4 334，分离度2.38。色谱图见图1。
2.1.4 标准曲线的制备 取丹皮酚对照品溶液1，2，5，10，15，20，25 μL进样，以进样量为横坐标，峰面积为纵坐标，得回归方程Y=5 679.4X-1 245.6，R2=0.999 9（n=7），线性范围 0.646～16.15 ng。
2.1.5 日内精密度 精密吸取对照品溶液10 μL，连续进样6次，测定丹皮酚峰面积，RSD 1.5%，表明仪器精密度良好。
[关键词] 释放; 透皮; 丹皮酚; HPLC; 活血止痛凝胶
活血止痛凝胶由白芷、牡丹皮、天南星、冰片等组成，有活血止痛、疏通经络的作用。外用凝胶剂作为新型的外用制剂，由于具有良好的生物相容性，易于涂抹，局部给药后易于吸收、不污染衣物、稳定性好。此外，凝胶基质多为亲水性高分子材料，有利于皮肤水合形成，促进药物的吸收，所以成为近年来外用制剂研究热点。本实验以方中君药牡丹皮中丹皮酚为指标，采用不同模型对体外释药曲线与经皮给药数据进行拟合，考察活血止痛凝胶的体外释放与经皮渗透规律。
1 材料
高效液相色谱仪（2487型双波长紫外检测器，717型自动进样器，美国Waters），BSA224S CW型电子分析天平（德国赛多利斯公司），TK-20B型Franz扩散池（上海锴凯有限公司），透析袋（截留相对分子质量7 000，北京经科宏达生物技术有限公司）。
活血止痛凝胶（自制，批号13111），丹皮酚（中国食品药品检定研究院，批号110708-200506），聚乙二醇（PEG，国药集团化学试剂有限公司），甲醇为色谱纯，水为哇哈哈纯净水，其余试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2.1 方法学考察
2.1.1 对照品溶液的制备 精密称取丹皮酚对照品适量，置10 mL量瓶中，加甲醇配成0.646 g·L-1的溶液，即得。精密移取上述对照品溶液0.1 mL，置于100 mL量瓶中，加甲醇定容至刻度，配成0.646 mg·L-1的对照品溶液备用。
2.1.2 供试品溶液的制备 取体外释放（透皮）接收液，过0.22 μm微孔滤膜，弃去初滤液，取续滤液，进样量10 μL。
2.1.3 色谱条件与系统适应性考察 高效液相色谱仪（2487型双波长紫外检测器，717型自动进样器，美国Waters），Diamonsil C18色谱柱（4.6 mm×250 mm，5 μm），流动相甲醇-0.1%磷酸水溶液（50∶50）;流速1.0 mL·min-1，柱温35 ℃，检测波长274 nm，理论塔板数为4 334，分离度2.38。色谱图见图1。
2.1.4 标准曲线的制备 取丹皮酚对照品溶液1，2，5，10，15，20，25 μL进样，以进样量为横坐标，峰面积为纵坐标，得回归方程Y=5 679.4X-1 245.6，R2=0.999 9（n=7），线性范围 0.646～16.15 ng。
2.1.5 日内精密度 精密吸取对照品溶液10 μL，连续进样6次，测定丹皮酚峰面积，RSD 1.5%，表明仪器精密度良好。