中晚期结直肠癌化疗中ATP-TCA技术的应用效果观察

孔玉莲 李肇彦 孔金燕 杨会燕 刘莉 杨宏煜

河南省邓州市人民医院，河南邓州 474150

[摘要] 目的 探讨分析中晚期结直肠癌化疗中ATP-TCA技术的应用效果。方法 回顾性分析该院2009年3月—2013年3月收治的100例中晚期结直肠癌患者的临床资料，并观察ATP-TCA技术的应用效果。结果 5-FU、L-OHP、MMC以及SN-38体外抗敏度之间没有明显的差异，差异无统计学意义(P＞0.05)，5-FU+L-OHP、5-FU+MMC以及5-FU+SN-38体外抗敏度之间也没有明显的差异，差异无统计学意义(P＞0.05)，4组单药与3组联合药物在体外抗敏度上有着明显的差异，差异有统计学意义(P＜0.05)。98例结肠癌患者中有效例数达到59例(60.20%)，ATP-TCA总预测准确率为64.29%(63/98)，阳性符合率为54.08%(53/98)。结论 ATP-TCA技术在中晚期结直肠癌化疗中应用，不仅能够检验化疗药物的敏感度，同时ATP-TCA技术对指导中晚期结直肠癌化疗也具有重要的作用。

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关键词 ATP-TCA技术；中晚期结直肠癌；效果

[中图分类号] R735.3[文献标识码] A[文章编号] 1674-0742(2014)03(a)-0177-02

[作者简介] 孔玉莲(1973,10-),女,汉族，河南邓州市，硕士，副主任医师，肿瘤内科。

近几年来，结肠癌的发病率在逐渐增加，并且发病年龄也逐渐趋向老龄化，发病多在60～70岁，男性多于女性。结肠癌的治疗一直是一个具有挑战性的临床问题，据相关文献研究[1]，手术后进行化疗能够延长患者的生存期，提高生活质量。为探讨分析中晚期结直肠癌化疗中ATP-TCA技术的应用效果,该研究选取该院自2009年3月—2013年3月这4年以来收治的100例中晚期结直肠癌患者标本进行ATP-TCA技术体外检测，根据检测结果指导患者临床化疗，取得了显著效果，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取该院收治的100例中晚期结直肠癌患者标本，所有患者均经过电子结肠镜以及临床病理诊断后进行手术治疗。其中男性患者有54例，女性患者有46例，年龄范围为63～79岁，平均年龄为(71±8)岁。其中高分化腺癌有17例，中分化腺癌有18例，低分化腺癌有37例，未分化癌15例，管状腺癌有8例，粘液腺癌有5例。所有患者没有严重的心、肾以及肝功能不全现象，没有肠梗阻，预计生存期＞3个月，血小板大于100×109/L,白细胞大于4×109/L。

1.2 抗癌药物

所有抗癌药物均在该院临床使用，主要包括氟尿嘧啶(5-FU)、奥沙利铂(L-OHP)、丝裂霉素(MMC)以及伊立替康(SN-38)等，其中奥沙利铂主要采用糖水稀释，其余药物采用生理盐水溶解稀释，在-20℃的温度下保存备用。

1.3 检测方法

所有患者取新鲜肿瘤组织之后侵入到装有培养液的无菌液瓶中，进行侵泡15 min，然后剪成大小为0.6～1 mm的3个碎块，将肿瘤组织转移到含有组织消化液的离心管中，放置37℃的孵育箱中进行孵育2～3 h，每隔15～30 min震荡1次，充分消化后，采用160目筛网滤得单细胞悬液，然后加入25mL培养基，混匀，400 g离心10 min，弃上清。若有明显红细胞沉淀，则需要进行去除红细胞的操作，最后将细胞浓度调整为3×109/mL-4×109/mL.

将培养板置于37℃、5%的二氧化碳饱和温度的细胞培养箱内，培养5 d，然后每孔加入50 μL的ATP提取液，吸出50 μL的上清液于检测板中，每孔加入50 μL的TAP荧光素-荧光酶，震荡10 s，采用荧光测定仪自带分析软件计算各个测试浓度抑制率以及各种药物的IC50(抑制50%肿瘤细胞生长药物浓度)和IC90(抑制90%肿瘤细胞生长药物浓度)。

1.4 统计方法

采用spss 13.0统计学软件对数据进行分析，其中检测后与标准样品采用t检验，临床治疗效果采用χ2检验。当P＜0.05，表示差异有统计学意义。

2 结果

2.1 结直肠癌细胞对各种抗癌药物的敏感度

100例结肠癌组织标本中有2例因为细菌污染而放弃，实验的可评价率为98%。5-FU、L-OHP、MMC以及SN-38体外抗敏度之间没有明显的差异，不具有差异统计学意义(P＞0.05)，5-FU+ L-OHP、5-FU+MMC以及5-FU+SN-38体外抗敏度之间也没有明显的差异，不具有差异统计学意义(P＞0.05)，4组单药与3组联合药物在体外抗敏度上有着明显的差异，具有差异统计学意义(P＜0.05)。

2.2 ATP-TCA检测结果与近期疗效之间的关系

根据ATP-TCA检测结果指导化疗，结果表明98例结肠癌患者中有效例数达到59例(60.20%)，ATP-TCA总预测准确率为64.29%(63/98)，阳性符合率为、54.08%(53/98)。

3 讨论

结肠癌作为常见的消化道恶性肿瘤，其治疗一直以来是临床中具有挑战性的问题。目前，随着ATP生物荧光法的发展，在肿瘤化疗药物敏感性检测中有着重要作用，其检测原理为当细胞受损时，ATP合成下降，细胞死亡时，ATP迅速水解消失，然后通过测定细胞内源性ATP的含量，就能够反映出细胞活性以及细胞数量[2]。国外学者已经对ATP-TCA检测法进行了多方面研究，并且在一定程度上也提高了临床治疗的可行性[3]。据我国文献报道[4]，由于肿瘤的异质性应该对结肠癌患者进行ATP肿瘤化疗药物的敏感性分析实验，有利于指导患者后期化疗。

在该研究中，所使用的抗癌药物主要有氟尿嘧啶(5-FU)、奥沙利铂(L-OHP)、丝裂霉素(MMC)以及伊立替康(SN-38)，通过药物敏感度实验表明，结肠癌细胞对3组联合药物的敏感度并没有明显的差异，差异无统计学意义(P＜0.05)。3组联合药物的敏感度与4组单药物有着明显的差异，并且，使用5-FU+ L-OHP药物的敏感度最高，达到55.10%，与相关文献报道相一致[5-6]。由于肿瘤的异质性存在不同，就致使不同肿瘤患者对于同一化疗药物的敏感性就不同，因此，必须建立个性化治疗方案，以免出现药物导致的不良反应现象[7]。应采用ATP-TCA检测法对常用化疗药物的敏感性以及耐药性进行提前检测，从而为临床化疗提供一定的依据。

综上所述，采用ATP生物荧光体外药敏检测法能够有效的检测化疗药物的敏感性，指导中晚期结肠癌患者化疗有着重要价值，值得临床推广应用。

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参考文献

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[2]Cho YB，Lee WY，Song SY，et aL.In vitro chem0sensitivity based on depth of invasion in advanced colorectal cancer using ATPbased chemotherapy response assay(ATP—CRA)[J].Eur J Surg Oncol,2009,35(9)：951-956.

[3]蒋松琪，何松，江晓晖.ATP生物荧光体外药敏检测在中晚期结直肠癌化疗药物筛选中的应用[J].临床肿瘤学杂志,2011(6)：56-57.

[4]吴学勇，谢芳，张正华.热疗同CapeOx化疗治疗晚期结直肠癌临床研究[J].中国癌症杂志,2009(3)：1023-1024.

[5]刘天舟，王瑞.结直肠癌患者血清中IGF-1、MMP-7和IGFBP-3水平分析[J].郑州大学学报(医学版),2011(5)：45-47.

[6]卢星榕，李绍堂，池畔.结直肠癌并同时性肝转移化疗敏感预测模型的建立[J].中华实验外科杂志,2013(7)：120-122.

[7]郭洪斌，刘意，郭春芳，等.ATP生物荧光法体外药敏试验在结肠癌化疗中的临床应用[J].中国老年学杂志,2008,28(1)：41-43.

(收稿日期：2013-11-10)