微柱凝胶法与凝聚胺法在交叉配血中的比较研究

　　摘要 目的：比较微柱凝胶法和凝聚胺法在交叉配血上的敏感性。方法：对327例需输血的患者采用微柱凝胶法和凝聚胺法进行交叉配血，比较微柱凝胶法和凝聚胺法的配血结果。结果：凝聚胺法检测出17例阳性样本，主侧凝集8例，次侧凝集14例，假阳性5例。微柱凝胶法检测出26例阳性样本，主侧凝集12例，次侧凝集18例，假阳性7例。微柱凝胶法耗时多于凝聚胺法。结论：在交叉配血中，微柱凝胶法比凝聚胺法的更敏感，更能检测出不完全抗体。两者联合应用能提高诊断的正确性，减少发生溶血性反应。 

　　关键词 微柱凝胶法；凝聚胺法；交叉配血；敏感性 

　　交叉配血试验包括主侧和次侧试验，主侧试验指检测供血者的红细胞与受血者的血清是否存在抗体一抗原反应。次侧试验指检测供血者的血清与受血者的红细胞是否存在抗体一抗原反应。两侧均不出现抗原一抗体的凝集反应可大输血，只是次侧凝集可以做直接抗球蛋白试验（DAT），DAT阳性强度高于次侧凝集强度，可进行大输血，否则输血量不应超过200 mL，否则可能发生溶血性反应。交叉配血的方法有抗球蛋白法、蛋白酶法、聚凝胺法及抗球蛋白等，本文主要比较微柱凝胶法与凝聚胺法的交叉配血结果。 

　　资料与方法 

　　2012年6月-2013年6月收治需输血患者327例，年龄4～85岁。供血者为我市的无偿献血者。标本采用EDTA-2K抗凝血1～2mL。 

　　基本仪器：凝聚胺介质试剂，75Tests/盒。微柱凝胶血型配血卡，血型卡专用离心机（24微柱凝胶卡数）及孵育器。 

　　检验方法：交叉配血试验首先应用凝聚胺法，在用微柱凝胶法检验。两者的阳性样本均加做直接抗人球蛋白试验。相关操作按说明书或文献要求进行：①凝聚胺法：将患者和供血者的血液标本分别离心，用生理盐水配制3%～5%的红细胞悬液约1 mL；取试管2支，分别用于主侧和次侧试验，主侧管中加入适量受血者的血清和供血者的红细胞悬液，次测管则相反；往2支中加入适量低离子溶液，混匀后静置1 min；加入适量的凝聚胺溶液于试管中，混匀后静置；于离心机3000 r/min离心1 min，弃掉上清液，保留0.1 mL管底液体。目测红细胞是否凝集，不凝集则重做。若凝集后1 min内散开，则为非特异性凝集，试验结果为阴性。若凝集不散开，则为特异性凝集，试验结果阳性。②微柱凝胶法：将患者和供血者的血液标本分别离心，用生理盐水配制0.5%～1%的红细胞悬液约1 mL；取2张配血卡，主侧配血卡上加入适量受血者红细胞悬液和适量受血者血清，次侧配血卡上则加入适量受血者血清和适量供血者红细胞；之后37℃孵育约15 min；离心1500 r/min约3 min。观察红细胞，若红细胞均沉积于管底则为阴性，否则判定为阳性。 

　　统计学处理：所得数据以（x±s）表示，用SPSS进行统计学分析。两组数据之间的比较采用t检验，P<0.05表示差异有统计学意义。 

　　结果 

　　凝聚胺法检测出17例阳性样本，主侧凝集8例，次侧凝集14例。微柱凝胶法检测出26例阳性样本，主侧凝集12例，次侧凝集18例。微柱凝胶法耗时多于凝聚胺法。两种方法的结果联合，再对阳性样本加做直接抗人球蛋白试验。发现凝聚胺法检测出现假阳性5例，微柱凝胶法检测出现假阳性7例，见表1。 

　　讨论 

　　根据结果显示，可见微柱凝胶法在交叉配血中的敏感性明显优于凝聚胺法，但是微柱凝胶法的操作方法较为复杂，所需要的时间多。而凝聚胺法的敏感性虽然略低，但操作较为简单，所需要的时间短，急诊中为首选方法。两者的联合应用有助于检测出不规则抗体，提高正确率，减少输血性反应的发生。对患者输入异型血，会造成溶血反应，抗原一抗体反应红细胞的细胞膜被破坏，血红蛋白从红细胞中流出。溶血性输血的发生率不高（0.004%），但一旦发生死亡率可高达40%。 

　　出现假阳性的原因有很多，如具有妊娠史和输血史的人容易产生免疫性抗体而导致主侧凝集，另外，白血病患者和自身免疫病的患者均容易产生主侧凝集；次侧凝集的假阳性，有妊娠史和输血史的人有异体血浆蛋白，因此也容易出现次侧凝集。另外，假阳性也可以由于自身抗体和药物引起。