茶多酚维E硒对小鼠抗氧化功能的影响

　　摘要：茶多酚、维生素Ｅ和硒都是较强的抗氧化剂，对多种疾病具有预防和治疗作用。试验选用５０只昆明清洁级小鼠，采用不同剂量茶多酚维Ｅ硒胶囊连续灌胃３０ｄ，通过测定小鼠受试前后体重、血清超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）活力及８Ｇｙ６０Ｃｏγ射线造模前后肝组织丙二醛（ＭＤＡ）含量、ＳＯＤ和谷胱甘肽过氧化物酶（ＧＳＨ－Ｐｘ）活力，研究茶多酚维Ｅ硒胶囊对小鼠抗氧化系统的影响。结果显示，与模型对照组相比，各剂量茶多酚维Ｅ硒胶囊对造模后小鼠肝组织ＳＯＤ活力无显著影响；７５、１５０ｍｇ／ｋｇ·ｂｗ茶多酚维E硒胶囊对造模后小鼠肝组织ＭＤＡ含量和ＧＳＨ－Ｐｘ活力也无显著影响；３００ｍｇ／ｋｇ·ｂｗ茶多酚维E硒胶囊剂量组可显著降低造模后小鼠肝组织ＭＤＡ含量，提高其ＧＳＨ－Ｐｘ活力。以上结果为茶多酚、维生素Ｅ和硒在食品及保健品中的联合应用提供了理论依据。

　　关键词：茶多酚；维生素Ｅ；硒；小鼠；抗氧化

　　生理条件下机体的氧化与抗氧化系统处于动态平衡，而在多种氧化应激条件下（如低氧、中毒和辐照等），机体氧化与抗氧化平衡失调，从而诱导氧化应激的产生。目前证实氧化应激能诱发动脉粥样硬化、高血压等多种慢性疾病，严重影响人类健康。因此利用抗氧化剂清除氧化应激产生的自由基成为化学、生物和医学等领域的研究热点。

　　茶叶中对人体健康最有益的物质是具有强抗氧化能力的茶多酚，是茶叶中多酚类物质的总称。主要可分为儿茶素类、黄酮及黄酮醇类、花青素类、酚酸及缩酚酸类。茶多酚的抗氧化作用是由于儿茶素Ｂ环和Ｃ环上的酚羟基持有供氢体的活性，在氧化过程中生成邻醌类及联苯酚醌。它可以有效清除氧自由基和脂类自由基，防止脂质过氧化，从而预防心血管疾病、肿瘤等疾病的发生［１］。已有研究表明抗氧化剂之间存在良好的协同效应，这种效应同样适用于茶多酚。现有研究证实，茶多酚和维生素共同使用可增加茶多酚的抗氧化［２－４］、抑菌［５－７］、降低自由基损伤［８］和保鲜［９］等作用。而在动物试验中，国内外大量文献证明了维生素Ｅ和硒联合使用能起到协同增效的抗损伤［１０］、抗氧化作用［１１，１２］。因此本试验用茶多酚维Ｅ硒胶囊对小鼠进行抗氧化功能研究，初步探讨多种抗氧化剂的协同增效机理。

　　１材料与方法

　　１．１样品

　　汤臣倍健茶多酚维Ｅ硒胶囊，批号：２０１０１００１，送检品为粉末（胶囊内容物），推荐成人服用量为０．９ｇ／（人·ｄ）。试验时样品均采用蒸馏水配制和稀释。

　　１．２试验动物

　　清洁级昆明种雌性小鼠共５０只，体重１８～２２ｇ，由四川省中医药科学院提供［合格证号：ＳＣＸＫ（川）２００８－１９］。试验前检疫１周，整个试验过程中，试验动物饲养于屏障级动物房（许可证号：四川省试验动物管理委员会第００１号），动物自由摄食和饮水，动物房温度２０～２３℃，相对湿度５５％～６５％。

　　１．３剂量分组

　　茶多酚维Ｅ硒胶囊按成人每日推荐服用量的５倍、１０倍、２０倍设３个剂量组，即７５、１５０和３００ｍｇ／ｋｇ·ｂｗ，每天分别称取７５、１５０和３００ｍｇ受试物，各加蒸馏水至２０ｍＬ混悬，按每１００ｇ体重２ｍＬ给动物灌胃。另设模型对照组和空白对照组。

　　１．４主要仪器和试剂

　　７２００型分光光度计，恒温水浴箱，微量可调加样器，高速离心机和低速离心机，漩涡混运器，ＤＹ８９－１型电动玻璃匀浆机；丙二醛（ＭＤＡ）、超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）、谷胱甘肽过氧化物酶（ＧＳＨ－Ｐｘ）测定试剂盒（购于南京建成生物工程研究所，４℃冰箱保存）；三氯甲烷、无水乙醇、冰乙酸等均为分析纯。

　　１．５试验方法

　　５０只小鼠随机分为５个组，每组１０只。茶多酚维E硒胶囊各剂量组小鼠每天灌胃给予不同剂量的茶多酚维E硒胶囊；模型对照组和空白对照组小鼠灌胃给予等体积蒸馏水，连续３０ｄ。试验开始前、试验中期及试验结束时对各组小鼠称重。３０ｄ后，尾部取血测超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）活力。同时，除空白对照组外，各组给予８Ｇｙ６０Ｃｏγ射线全身一次性照射，照射后第四天处死全部动物，取０．２～０．３ｇ肝组织，用冷生理盐水制成１０％的肝匀浆，４０００ｒ／ｍｉｎ离心５ｍｉｎ。直接取１０％肝匀浆上清液１００μＬ测定ＭＤＡ含量，１０％肝匀浆上清液稀释１０倍后取１０μＬ测定ＳＯＤ活力，１０％肝匀浆上清液稀释４０倍后取２００μＬ测定ＧＳＨ－Ｐｘ活力。测定的具体方法按照南京建成生物工程研究所购买的ＭＤＡ、ＳＯＤ和ＧＳＨ－Ｐｘ试剂盒说明书进行。

　　１．６数据统计

　　试验数据均以平均数±标准差表示。采用ＰＥＭＳ３．０《中国医学百科全书·医学统计学》统计软件包（第三版）对试验数据进行处理。

　　２结果与分析

　　２．１茶多酚维Ｅ硒胶囊对小鼠体重的影响

　　由表１可见，在试验期间，各组小鼠体重差异不显著（Ｐ＞０．０５），表明茶多酚维Ｅ硒胶囊对小鼠体重无显著影响。

　　２．２茶多酚维Ｅ硒胶囊对造模前小鼠血清ＳＯＤ活力的影响

　　由表２可见，造模前各组小鼠血清中ＳＯＤ活力差异不显著（Ｐ＞０．０５）。表明茶多酚维Ｅ硒胶囊对小鼠血清ＳＯＤ活力无显著影响。

　　２．３茶多酚维Ｅ硒胶囊对小鼠肝组织ＭＤＡ含量的影响

　　由表３可见，模型对照组小鼠肝组织中ＭＤＡ含量显著（Ｐ＜０．０５）高于空白对照组，茶多酚维Ｅ硒胶囊３００ｍｇ／ｋｇ·ｂｗ剂量组小鼠的ＭＤＡ含量与模型对照组相比显著（Ｐ＜０．０５）降低，茶多酚维Ｅ硒胶囊７５和１５０ｍｇ／ｋｇ·ｂｗ剂量组与模型对照组相比差异均不显著（Ｐ＞０．０５）。