不同产地加工方法对江苏省东海县种植基地金银花质量影响的研究

　　[摘要]以绿原酸、木犀草苷含量，液相指纹图谱相似度为评价指标，考察自然晒干、烘房烘干、微波杀青烘干、滚筒杀青烘干、硫磺熏蒸阴干5种不同产地加工方法对江苏省东海县药材种植基地金银花质量的影响。结果表明不同产地加工方法对金银花药材中绿原酸含量、液相指纹图谱相似度有显著影响，对木犀草苷含量无明显差异。微波杀青烘干、滚筒杀青烘干样品绿原酸含量较高，分别为3.67%，3.39%，液相指纹图谱相似度分别为0.815，0.793；烘房烘干、硫磺熏蒸阴干样品绿原酸质量分数分别为2.87%，2.53%，液相指纹图谱相似度分别为0.964，0.765；晒干样品绿原酸质量分数最低为1.92%，液相指纹图谱相似度为0.940。根据研究结果，同时结合江苏康缘药业股份有限公司金银花药材内控标准，东海县种植基地金银花最佳加工方法为烘房烘干法，该研究为江苏省东海县药材基地金银花产地加工方法的确定提供了理论依据。

　　[关键词]江苏省东海县；金银花；产地加工方法；绿原酸；木犀草苷；液相指纹图谱相似度

　　金银花为忍冬科植物忍冬的干燥花蕾或带初开的花[1]，具有清热解毒、疏散风热之功效[2]。传统上以河南封丘县、山东平邑县为道地产区[3]。金银花主要含有机酸类、黄酮类、三萜皂苷类、环烯醚萜苷类和挥发油类等化学成分[4-6]；具有抗炎、抗菌、解热、抗病毒、抗内毒素、抗真菌、降压保肝利胆、免疫调节等作用[7-8]。

　　江苏康缘药业股份有限公司为保证热毒宁注射液质量稳定性，提升产品安全性，在江苏省东海县建立了万亩金银花种植基地，所种植金银花经中国中医科学院中药资源中心黄璐琦研究员鉴定确认为忍冬科忍冬属植物忍冬L. japonica。采收期、加工方法、贮藏等过程都有可能导致金银花药材质量下降，其中，药材产地加工干燥是控制药材质量的重要环节[9]。目前，金银花的产地加工方法主要有以下4种：自然晒干、烘房烘干、微波杀青烘干、滚筒杀青烘干。传统的自然晒干方法，其指标性成分绿原酸的含量受采收加工期的天气条件影响波动较大。为了减少气候因素对金银花品质的影响，种植规模较大的农户多已采用烘房烘干，既保证了质量，也缩短了干燥时间[10]。采用杀青烘干干燥法能够快速杀死多氧化酶，绿原酸的含量较高[9]。滚筒杀青机杀青后烘干的原理是利用高温快速杀酶，后2种加工方法在部分种植区已有应用。

　　本文采用不同干燥方法对江苏省东海县种植基地金银花药材进行产地加工方法研究，结合热毒宁注射液药材内控标准及基地规范法种植需求，确定最佳的产地干燥加工方法，为江苏省东海县种植基地金银花干燥方法的确定提供理论依据。

　　1材料

　　高效液相色谱仪Agilent 1100（美国安捷伦公司）；LK-200A 100g手提式高速中药粉碎机（浙江温岭市创立药材仪器厂）；数显恒温水浴锅HH-4（国华电器有限公司）；微波杀青机（南京博有微波）；滚筒杀青机（山东省营南壮岗继宏茶叶机械厂）；烘房（江苏康缘药业股份有限公司自建）。

　　绿原酸，木犀草苷对照品（中国食品药品检定研究院，批号分别为110753-200413，111720-200501）；乙腈为（色谱纯，Tedia company）；甲醇（分析纯，南京化学试剂有限公司）；冰醋酸（分析纯，南京化学试剂有限公司），水为重蒸馏水，其余试剂均为分析纯。

　　2方法与结果

　　2.1样品处理

　　采收江苏省东海县种植基地同一种植田二白期金银花鲜花25.0 kg，混合均匀，均分为5等份，分别采用自然晒干、烘房烘干、滚筒杀青、微波杀青、硫磺熏蒸5种产地加工方法获得金银花干花；5种加工方法干燥温度及时间是实际干燥操作过程的监控数据，参数设置参考多篇文献及预实验的结果后设计的。本实验在相同地块重复进行10次，含量测定与液相指纹试验结果取10次实验平均值。

　　2.1.1自然晒干样品 取鲜花平铺于长1.5 m，宽0.5 m的芦苇席上，平铺厚度约0.3 cm，于10：00放于阳光充足的地方晾晒，晾晒过程不翻动，17：30收于房间中，如此连续，于第4次下午14：30收样，日晒时间共27 h，日晒时天气晴朗，正午温度26～28 ℃，湿度65%～75%，样品标记为晒干样品S1。

　　2.1.2烘房烘干样品 取鲜花平铺于长1.5 m，宽0.8 m的筛网中，平铺厚度约0.3 cm，放于东海基地自建烘房烘干，温度控制为30～35 ℃烘烤1 h，40～45 ℃烘烤7 h，60～65 ℃烘烤8 h，烘干时间共16 h，得到烘房烘干样品S2。

　　2.1.3微波杀青烘干 取鲜花，摊于传输带上，进入杀青机，进行微波杀青，鲜花经过设备主体部分时间为90～100 s，微波杀青后出口花温度为90～95 ℃，杀青后花平铺于筛网，平铺厚度约0.3 cm，放于自建烘房中烘干，烘干的温度为1 h内，温度由室温升至50 ℃，50～60 ℃保持3 h，70 ℃保持2 h，干燥时间共约6 h，得到微波杀青烘干样品S3。

　　2.1.4滚筒杀青烘干 当杀青机表面温度达到290 ℃时，保持稳定，取鲜花均匀加入到杀青机中，鲜花杀青时间为85～90 s，出口鲜花温度为90～95 ℃，滚筒杀青后的鲜花平铺于筛网上，平铺厚度约0.3 cm，进烘房烘干，烘干的温度为1 h内，温度由室温升至50 ℃，保持50～60 ℃ 3 h，70 ℃保持2 h，停风机，停炉，干燥时间共约6 h，得到滚筒杀青烘干样品S4。

　　2.1.5硫磺熏蒸阴干 取鲜花平铺于熏蒸框筛网上，硫磺置于框底，晒网上用塑料密封，点燃硫磺进行熏蒸，熏蒸时间约12 h，熏蒸后药材阴干，阴干时间47 h，得到硫磺熏蒸阴干样品S5。

　　2.2绿原酸、木犀草苷含量测定[2]

　　2.2.1绿原酸测定色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-0.4%磷酸溶液（13∶87）为流动相；检测波长327 nm。理论板数按绿原酸峰计算应不低于1 000。

　　2.2.2木犀草苷测定色谱条件与系统适用性试验 以苯基硅烷键合硅胶为填充剂（Agilent ZORBAX SB-phenyl，4.6 mm×250 mm，5 μm），流动相乙腈（A）-0.5%冰醋酸溶液（B），梯度洗脱，0～15 min，10%～20% A；15～30 min，20% A；30～40 min，20%～30% A。检测波长350 nm。理论板数按木犀草苷峰计算应不低于20 000。色谱图见图1，2。