液基细胞学联合HPV基因分型检测在宫颈癌前病变筛查中的应用探讨

李 云

江苏省金坛市第二人民医院妇产科，江苏金坛 213200

[摘要] 目的 探讨分析液基细胞学联合HPV（human papillomavirus 人乳头状瘤病毒）基因分型检测在宫颈癌前病变筛查中的临床应用价值。方法 抽取在2013年1月—2014年8月间该院收治的380例经液基细胞学检查有异常的为非典型鳞状上皮细胞及以上的患者，对这些患者进行液基细胞学联合HPV（human papillomavirus 人乳头状瘤病毒）基因分型检测，对研究结果进行回顾性对比分析。结果 检查结果为非典型鳞状上皮细胞及以上患者同时合并HPV 阳性患者有130例, 其中ASCUS（非典型鳞状上皮细胞）、LSIL（低度鳞状上皮内病变）、HSIL（高度鳞状上皮内病变）、SCC（人鳞状细胞癌）的所占百分比分别为78（60%）、40（30.77%）、7（5.38%）、5（3.85%）；130例患者中 HPV高危型患者有48例，AUSCS、LISL、HISL、SCCHPV高危型患者所占百分比分别为22（27.85%）、17（42.5%） 、4（57.14%） 、5（100%），研究结果显示SCC和HPV高危型感染有直接的联系。HPV高危型患者有48例,平均年龄43.6岁; HPV低危型患者有 82例, 平均年龄32.7岁，差异有统计学意义（P＜0.05）。 结论 采用液基细胞学联合HPV基因分型检测能够有效的诊断出宫颈癌病变，数据比较准确可靠，值得在临床上推广应用。

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关键词 ] 液基细胞学；HPV基因分型检测；宫颈癌；前筛查；临床应用

[中图分类号] R737.33 [文献标识码] A [文章编号] 1674-074２（２０１5）03（a）－０008-02

宫颈癌是临床上一种比较常见的恶性肿瘤，在中老年患者中的发病率比较高，随着人们生活习惯的改变，宫颈癌的发病率呈上升趋势，而且发病人群中青年人数在逐年增加。宫颈癌患者的临床症状主要表现为阴道接触性出血、阴道排液、排液增多甚至继发感染等[1]。阴道出血量因人而异，主要根据患者病灶的范围和病情的程度而决定。导致宫颈癌的因素尚不明确，主要和早婚、早育、性生活紊乱以及包皮垢中的胆固醇经细菌作用后可转变为致癌物质等因素有关[2]。在临床上如何及早的诊断和治疗宫颈癌一直备受关注的课题，随着医学技术的不断进步和发展，宫颈癌的诊断和检测方法也在不断的更新，HPV是人乳头瘤病毒，它的持续感染是造成癌前病变和宫颈癌发病的主要的致病因子。为探讨分析液基细胞学联合HPV（human papillomavirus 人乳头状瘤病毒）基因分型检测在宫颈癌前病变筛查中的临床应用价值，该院2012年1月—2014年8月间就液基细胞学联合HPV基因分型检测在宫颈癌前病变筛查中的临床应用价值这个课题展开研究，取得了令人满意的成果，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

抽取该院收治的380例经液基细胞学检查有异常的为非典型鳞状上皮细胞及以上的患者，患者年龄为20~75岁，平均为（41.8±3.73）岁，这些患者中排除妊娠期、子宫切除、有盆腔放射治疗史、急性生殖道炎症、患有严重的内外科疾病以及恶性肿瘤患者，所有患者都为自愿接受研究治疗。对所有患者都进行HPV基因分型检测。

1.2 方法

仪器和试剂：TCT仪，选自美国新柏氏公司，HPV分型基因芯片试剂盒选用深圳凯普生物技术有限公司生产的，电子阴道镜的类型为SLC—2000B型[3]。

液基细胞学标本的采集：清洗患者外阴，用TCT取样器在患者的宫颈和颈管部位轻轻抵住，然后按照顺时针的方向旋转8圈后，取出放入到保存液瓶内振荡摇匀后经过一系列的规范化的处理，制成薄层的图片，用95％的酒精固定后，HE（hematoxylin-eosin staining 伊红）染色，中性树胶封片[4]。

HPV检测方法：患者在月经开始前的3 d之内不能进行阴道的冲洗和放药治疗，2 d内不能进行性生活。用取样刷在患者的宫颈口部位按照逆时针方向转动3圈，然后停留10 s，将取样刷在放有细胞保存液的试管中，由专业人士进行处理和送检[5]。

1.3 观察指标

临床细胞学诊断指标根据2001年TBS（宫颈细胞学）诊断标准，即在正常范围内的、意义不明的ASCUS、低度鳞状上皮病变、高度鳞状上皮病变、鳞状细胞癌，除了在正常范围内的，其余均为阳性[6]。

HPV基因分型检测指标：当HPV单一性的感染时，可以在模芯片的对应位置处看到一个蓝色的斑点，如果存在双重或者多重的感染，则能看到两个或者多个有颜色的斑点[7]。

1.4 统计方法

研究中的基本的数据都采用spss 12.0软件进行统计处理，计数资料进行χ2值检验，以率（％）表示。

2 结果

检查结果为非典型鳞状上皮细胞及以上患者同时合并HPV 阳性患者有130例, 其中ASCUS、LSIL、HSIL、SCC的所占百分比分别为79（60.77%） 、40（30.77%）、7（5.38%） 、5（3.85%），见表1。

130例患者中 HPV高危型患者有48例，AUSCS、LISL、HISL、SCCHPV高危型患者所占百分比分别为22（27.85%）、17（42.5%） 、4（57.14%） 、5（100%），而在非典型鳞状上皮细胞及以上患者同时合并HPV 阳性130例患者中，SCC患者5例，全部为高危型患者，即显示SCC和HPV高危型感染有直接的联系。HPV高危型患者有48例,平均年龄43.6岁; HPV低危型患者有 82例, 平均年龄32.7岁，差异有统计学意义（P＜0.05）。

3 讨论

该院对液基细胞学联合HPV基因分型检测在宫颈癌前筛查中的应用展开研究，研究结果显示SCC和HPV高危型感染有直接的联系，而且患者年龄在很大程度上和HPV感染的程度有很大的联系。高危型HPV病毒可以从感染到癌变的全过程中被检测出，同时能够确定已经发生细胞形态改变者的病因；液基细胞学能检测已经发生的细胞学改变, 可判断是否进入临床期，两者协同作用，效果显著。

宫颈癌是临床上一种比较常见的恶性肿瘤，目前宫颈癌的发病率呈现上升的趋势，而且年轻患者的人数也在不断的增加，所以，对宫颈癌进行及早的筛查、诊断和治疗则显得至关重要。采用液基细胞学联合HPV基因分型检测对宫颈癌进行筛查的应用前景比较广阔，HPV在目前的临床应用中具有较高的假阴性率，作为导致宫颈癌发病的重要因素，HPV基因分型检测的结果在一定程度上显得至关重要，但是部分的假阴性率会对结果造成干扰，所以逐渐的在临床中被液基细胞学检查所代替[8]。

液基细胞学检查是采用液基薄层细胞检测系统检测宫颈细胞并进行细胞学分类诊断，它是目前临床上使用较为广泛的一种技术，宫颈防癌细胞学检查对宫颈癌细胞的检出率为100%，同时还能发现部分癌前病变，微生物感染如霉菌、滴虫、病毒和衣原体等，液基测试子宫颈细胞样本的数量，可以明显提高癌变细胞的检测率，减轻患者由于担心被二次检测而引起的担心。人乳头状瘤病毒（HPV）与宫颈癌关系密切，宫颈癌是妇女第二大致死癌病，临床证明95%~99.7%的宫颈癌病例和高危型HPV病毒感染有关，高危型HPV导致癌病的机会较高，科学研究发现至少有20种高危型HPV与95%的早期浸润和浸润性子宫颈癌有关。HPV感染，特别是高危型HPV感染，与宫颈癌的发生存在明确关系。对HPV病毒感染进行准确的检测可提高宫颈癌前病变筛查的敏感性，同时改善妇女宫颈癌的防治。宫颈癌早期症状不明显，筛查预警对早期发现宫颈癌，降低死亡率极为重要。

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参考文献]

[1] 姜清明. 液基细胞学联合HPV基因分型检测在宫颈癌前病变筛查中的应用[J]. 现代医学，2011,39（1）:45-46.

[2] 宗晓亮，申艳霞，贾志霞.液基细胞学联合HPV基因分型检测在宫颈癌前病变筛查中的应用分析[J].现代诊断与治疗，2013，24（12）:2743-2745.

[3] 潘秦镜，李凌，郎景和. 高危型人乳头瘤病毒杂交捕获法II评估宫颈上皮内瘤变的临床价值[J]. 中国医科科学院学报，2008（3）:395-398.

[4] 郭慧英，邱华珍. 阴道镜在宫颈上皮内瘤变筛查中的应用[J]. 医学论坛杂志，2010,31（23）:124-125.

[5] 郭柳薇，郭豪. TCT、HPV-PCR和阴道镜检查在宫颈癌疾病诊断中的应用研究[J].中国妇幼保健，2013(22):136-138.

[6] 黎哲斌，魏焕娣. TCT、HPV-PCR和阴道镜在宫颈癌疾病诊断中的应用研究[J].分子诊断与治疗杂志，2011(6):406-409.

[7] 何伟华.TCT和阴道镜与TCT、HPV和阴道镜在宫颈癌筛查中应用体会[J].中外福尔健康,2011(4):164-165.

[8] 杨晓月. 液基细胞学联合HPV-DNA检测在宫颈癌及癌前病变中的临床价值[D].济南：山东大学，2011.

（收稿日期：2014-11-25）