黄苞大戟化学成分研究

　　[摘要]对黄苞大戟Euphorbiasikkimensis地上部分的化学成分进行研究。应用硅胶，SephadexLH-20，RP-18等色谱技术进行分离纯化，采用NMR等谱学方法鉴定结构。从黄苞大戟地上部分的90%乙醇提取物的乙酸乙酯萃取物中分离得到16个化合物，分别鉴定为柚皮素（1）、山柰酚（2）、槲皮素（3）、山柰酚-3-O-α-L-吡喃阿拉伯糖苷（4）、槲皮素-3-O-α-L-吡喃阿拉伯糖苷（5）、槲皮素-3-O-（2″-没食子酰基）-α-L-吡喃阿拉伯糖苷（6）、麦角甾醇过氧化物（7）、豆甾-5-烯-7-羰基-3β-甾醇（8）、3β-羟基-4α，14α-二甲基-5α-麦角甾醇-8，24（28）-二烯-7-酮（9）、β-谷甾醇（10）、10-葫芦二烯醇（11）、莨菪亭（12）、没食子酸乙酯（13）、对羟基苯甲醛（14）、3-羟基苯乙醇（15）、2，4-二羟基-6-甲氧基苯乙酮（16）。所有化合物均为首次从黄苞大戟中分离得到，其中化合物1，4～8，15为首次从大戟属植物中分离得到。

　　[关键词]黄苞大戟；黄酮苷；麦角甾醇；三萜；酚类化合物

　　特殊的生态环境不仅对植物的演化和变异具有重要的作用，而且对植物产生的次生代谢产物也具有很大影响。西藏由于空气稀薄、日照充足、气温较低、降水较少与复杂多样的地形地貌共同形成了独特的高原气候，其独特的地理环境及气候条件势必造就了特殊的生物资源。黄苞大戟为大戟科大戟属多年生草本植物，产于广西、贵州、湖北、四川、云南和西藏[1]。黄苞大戟作为一种鄂西民族植物药材，用于肾炎水肿、腹胀、便秘，疟疾，风湿，黄疸等疾病的治疗[2]。目前对黄苞大戟的化学成分研究未见报道，为了阐明其药效物质基础和发现结构新颖的活性次生代谢产物，本课题组对产自西藏林芝地区的黄苞大戟地上部分的90%乙醇提取物的乙酸乙酯萃取物的化学成分进行了系统的研究，发现其中含有二萜、三萜、甾体、生育酚衍生物等类型的次生代谢产物[3-4]，在本课题组后续的研究中又分离得到其他16个化合物，运用各种波谱学手段鉴定了他们的结构。所有化合物均为首次从黄苞大戟中分离得到，其中化合物1，4～8，15为首次从大戟属植物中分离得到，本论文对这些次生代谢产物的提取、分离和波谱数据进行报道。

　　1材料

　　FinniganMAT90型质谱仪，BrukerAM-400（400MHz），DRX-500（500MHz）和AvanceⅢ600（600MHz）核磁共振光谱仪，以TMS为内标测定；Agilent1200型HPLC，ZorbaxSB-C18色谱柱（分析柱4.6mm×250mm，5μm；半制备柱9.4mm×250mm，5μm），BUCHIR-210旋转蒸发仪，柱色谱硅胶（200～300目）及薄层色谱硅胶板GF254均为青岛海洋化工厂生产，SephadexLH-20为AmershamBiosciences公司产品，RP-18为Merck公司产品，MCI为三菱公司产品。

　　黄苞大戟采自西藏林芝地区，由中国科学院昆明植物研究所杨永平研究员鉴定为黄苞大戟EuphorbiasikkimensisBoiss，标本（Yangyp-20100936）保存于中国科学院昆明植物研究所标本馆。

　　2提取与分离

　　黄苞大戟的干燥地上部分11kg，粉碎后用90%乙醇室温下冷浸24h，药材被重复提取3次，过滤后，提取液减压条件下回收至无醇味，用水混悬，依次用乙酸乙酯、正丁醇萃取，得乙酸乙酯浸膏1054g，浸膏用乙醇溶解经MCI脱色后用硅胶柱色谱（氯仿-丙酮1∶0～1∶1）梯度洗脱进行粗分，合并相同流分，得6部分（Fr.1～Fr.6），Fr.1经凝胶柱色谱（氯仿-甲醇1∶1）纯化后用RP-18（甲醇-水3∶7～1∶0）梯度洗脱划为6小部分（Fr.1-1～Fr.1-6），Fr.1-5经硅胶柱色谱（氯仿-乙酸乙酯4∶1）分离为2部分，第一部分经HPLC半制备（87%甲醇）得到化合物7（1mg，tR=7.3min），8（5mg，tR=8.9min），9（1mg，tR=10.3min），第二部分经反复重结晶得化合物10（63mg），Fr.1-6经硅胶柱色谱（石油醚-乙酸乙酯4∶1）纯化得化合物11（8mg）；Fr.4经凝胶柱色谱（氯仿-甲醇1∶1）分离为3部分，第2部分经硅胶柱色谱（氯仿-乙酸乙酯2∶1）反复纯化得化合物12（30mg），16（23mg），第三部分经硅胶柱色谱（氯仿-丙酮4∶1）反复纯化得化合物13（12mg），14（11mg），15（23mg）；Fr.5经凝胶柱色谱（氯仿-甲醇1∶1）分离为2部分，第一部分经硅胶柱色谱（氯仿-丙酮3∶2）得化合物1（3mg），第二部分经硅胶柱色谱（氯仿-甲醇9∶1）纯化得化合物2（9mg），3（35mg）；Fr.6经凝胶柱色谱（氯仿-甲醇1∶1）分离为3部分，第一部分经硅胶柱色谱（氯仿-甲醇4∶1）反复纯化得化合物4（54mg），5（53mg），第2部分经胶柱色谱（氯仿-甲醇3∶2）纯化的化合物6（90mg）。

　　3结构鉴定

　　化合物1无色粉末；1H-NMR（acetone-d6，400MHz）δ：12.17（1H，brs，5-OH），9.68（1H，brs，7-OH），8.56（1H，brs，4′-OH），7.39（2H，dd，J=1.8，6.8Hz，H-2′，6′），6.89（2H，dd，J=1.8，6.8Hz，H-3′，5′），5.95（1H，d，J=2.2Hz，H-8），5.94（1H，d，J=2.2Hz，H-6），5.45（1H，dd，J=3.0，12.9Hz，H-2a），3.18（1H，dd，J=12.9，17.1Hz，H-3a），2.72（1H，dd，J=3.0，17.1Hz，H-3e）；13C-NMR（acetone-d6，150MHz）δ：79.9（C-2），43.4（C-3），197.2（C-4），165.2（C-5），96.7（C-6），167.3（C-7），95.8（C-8），164.3（C-9），102.9（C-10），130.7（C-1′），129.0（C-2′，6′），116.1（C-3′，5′），158.7（C-4′）。以上数据与文献[5]报道的柚皮素数据基本一致。